U-CH1

Bunka U-CH1 je prvým vytvoreným trvalým modelom ľudských chordómových buniek, odvodeným z recidivujúceho sakrálneho chordómu. Chordómy sú zriedkavé, pomaly rastúce, lokálne invazívne nádory, ktoré vznikajú zo zvyškov notochordy a vyskytujú sa predovšetkým pozdĺž axiálneho skeletu. U-CH1 vykazuje cytogenetické vlastnosti charakteristické pre chordóm, vrátane klonálnych chromozómových aberácií, ako je der(1)t(1;22), delécie na chromozómoch 4, 5, 6, 9, 10 a 20 a derivát chromozómu 20 vyplývajúci z t(10;20). Komparatívna genomická hybridizácia odhalila opakované zmeny počtu kópií DNA v chordómoch, najmä straty na 1p a 3p a zisky na 7q, 5q, 12q a 20. Cytogenetický profil U-CH1 úzko odzrkadľuje profil jeho rodičovského nádoru, čo posilňuje jeho biologickú relevanciu.

Funkčne a molekulárne vykazujú U-CH1 a iné bunkové línie chordómov charakteristické znaky chordómov, vrátane expresie brachyury, transkripčného faktora považovaného za kľúčový diagnostický marker. U-CH1 tiež obsahuje delécie CDKN2A a chýba mu expresia proteínu p16, čo je opakovaná genetická alterácia v chordómoch. Táto zmena vedie k hyperaktivácii dráhy CDK4/6, čím sa U-CH1 stáva citlivým na inhibítory CDK4/6, ako je palbociclib. Liečba palbociclibom významne znížila hladiny fosforylovaného Rb a inhibovala proliferáciu in vitro, čo naznačuje, že U-CH1 môže byť cenným predklinickým modelom na hodnotenie terapií zameraných na bunkový cyklus. Bunka bola tiež validovaná prostredníctvom profilovania mRNA a proteínov, čo potvrdilo jej reprezentatívnosť primárnych chordómových nádorov v expresii a genomických vzoroch.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke