U-CH1

A linha celular U-CH1 é o primeiro modelo celular permanente de cordoma humano estabelecido, derivado de um cordoma sacral recorrente. Os cordomas são tumores raros, de crescimento lento e invasão local, que se originam de remanescentes da notocorda e ocorrem principalmente ao longo do esqueleto axial. A U-CH1 exibe características citogenéticas características do cordoma, incluindo aberrações cromossómicas clonais, tais como der(1)t(1;22), deleções nos cromossomas 4, 5, 6, 9, 10 e 20, e um cromossoma 20 derivado resultante de t(10;20). A hibridização genómica comparativa revelou alterações recorrentes no número de cópias de ADN nos cordomas, particularmente perdas em 1p e 3p e ganhos em 7q, 5q, 12q e 20. O perfil citogenético do U-CH1 reflete de perto o do seu tumor parental, reforçando a sua relevância biológica.

Funcional e molecularmente, a U-CH1 e outras linhas celulares de cordoma apresentam características marcantes do cordoma, incluindo a expressão de braquiúria, um fator de transcrição considerado um marcador diagnóstico fundamental. A U-CH1 também apresenta deleções de CDKN2A e falta a expressão da proteína p16, uma alteração genética recorrente em cordomas. Essa alteração leva à hiperativação da via CDK4/6, tornando o U-CH1 sensível a inibidores de CDK4/6, como o palbociclib. O tratamento com palbociclib reduziu significativamente os níveis de Rb fosforilado e inibiu a proliferação in vitro, indicando que o U-CH1 pode ser um modelo pré-clínico valioso para avaliar terapias direcionadas ao ciclo celular. A linha celular também foi validada através do perfil de mRNA e proteínas, confirmando a sua representatividade dos tumores de cordoma primários em termos de expressão e padrões genómicos.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia