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EFO-27
Tecido
Metastático
Doença
Adenocarcinoma mucinoso do ovário
Local da metástase
Omento
Sinónimos
EFO 27, EFO27

Documentos

EFO-27

Cell line · Número do produto 305769

The EFO-27 cell line is a human ovarian carcinoma model derived from a moderately differentiated serous papillary adenocarcinoma. It was established from ...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular EFO-27 é um modelo de carcinoma ovariano humano derivado de um adenocarcinoma papilar seroso moderadamente diferenciado. Foi estabelecida a partir de uma metástase omental sólida numa doente com cancro do ovário em fase avançada. A EFO-27 faz parte de uma série de linhas celulares derivadas de tumores ovarianos, desenvolvidas para explorar a regulação hormonal da proliferação das células cancerígenas do ovário. Nas primeiras passagens, a EFO-27 foi descrita como aneuploide, com um número modal de cromossomas superior a 100, indicando um elevado grau de instabilidade cromossómica, uma característica comum dos carcinomas ováricos serosos de alto grau.

As células EFO-27 apresentam uma morfologia epitelóide in vitro e demonstraram formar estruturas multicelulares em forma de cúpula em cultura monocamada, um fenótipo por vezes associado ao transporte ativo de iões e à formação de junções apertadas. Em meios sem soro, a proliferação do EFO-27 foi estimulada por hormonas gonadotrópicas, especificamente a gonadotrofina coriônica humana (hCG) e a hormona folículo-estimulante (FSH), sugerindo que as células mantêm vias de sinalização funcionais dos recetores hormonais. Esta capacidade de resposta destaca o papel potencial da sinalização da gonadotrofina na promoção do crescimento e progressão do tumor no carcinoma do ovário e reforça a EFO-27 como um modelo relevante para o estudo de mecanismos impulsionados por hormonas na biologia do cancro do ovário.

O EFO-27 também foi incluído em importantes conjuntos de dados multi-ómicos, tais como a Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) e o COSMIC, onde o seu perfil genómico contribui para o mapeamento da sensibilidade aos fármacos e a classificação dos subtipos tumorais. Estes conjuntos de dados fornecem camadas adicionais de informação, incluindo expressão genética, alterações no número de cópias e panorama mutacional, posicionando o EFO-27 como um recurso bem caracterizado para a investigação pré-clínica no cancro do ovário.

Tecido
Metastático
Doença
Adenocarcinoma mucinoso do ovário
Local da metástase
Omento
Sinónimos
  • EFO 27
  • EFO27

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Tipo de célula
Células epitelioides que crescem de forma aderente numa monocamada
Tempo de duplicação
29 horas

04Identificadores

Referência
EFO-27 (número de catálogo Cytion 305769)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1192

05Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
Mutação: PTEN, simples, p.Lys267Argfs*9 (c.800delA) (p.Leu265fs, c.795delA), heterozigótica (Cosmic-CLP=906852), TP53, simples, p.Arg273Cys (c.817C>T), heterozigótica (Cosmic-CLP=906852)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Adicione ao meio 20 % de FBS, 2,0 mM de L-glutamina, 1 % de NEAA e 1 mM de piruvato de sódio
Reagente de dissociação
Accutase
Densidade de sementeira
1 a 3 x 10⁴ células/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
36 anos
Etnia
Caucasiano