Prejsť na obsah
Jurkat
Tkanivo
Krv
Choroba
T-bunková akútna lymfoblastická leukémia
Miesto metastáz
Periférna krv
Synonymá
JURKAT, JM, JM-Jurkat, Jurkat-FHCRC, Jurkat FHCRC, FHCRC-11, FHCRC subclone 11, FCCH1024

Dokumenty

Jurkat

Cell line · Číslo výrobku 302147

Jurkat cells, which originated from the peripheral blood of a 14-year-old with T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL), are a well-known human T lymph...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky Jurkat, ktoré pochádzajú z periférnej krvi 14-ročného pacienta s T-bunkovou akútnou lymfoblastickou leukémiou (T-ALL), sú dobre známou ľudskou T-lymfocytovou bunkovou líniou, ktorá sa bežne používa v štúdiách bunkovej biológie, najmä pri výskume rakoviny a porúch imunitného systému. Tieto bunky zohrávajú kľúčovú úlohu pri pochopení rôznych bunkových procesov vrátane mechanizmov bunkovej smrti, aktivity autofágie a cytoplazmatických transkripčných faktorov.

Bunky Jurkat sa bežne používajú pri výskume HIV vďaka expresii receptora CD4 na ich bunkovej membráne. Receptor CD4 je primárnym receptorom, ktorý HIV využíva na vstup do hostiteľských buniek. Keďže bunky Jurkat exprimujú tento receptor, môžu byť infikované vírusom HIV, čo z nich robí užitočný model na štúdium interakcií HIV s ľudskými T-bunkami, ktoré sú hlavným cieľom vírusu v ľudskom tele. Využitie buniek Jurkat pri aktivácii HIV a štúdiách životného cyklu infekcie HIV významne prispelo k pochopeniu interakcií vírusu s ľudskými bunkami a bolo nápomocné pri identifikácii potenciálnych cieľov pre antiretrovírusové terapie.

Jurkat bunky ďalej zohrávajú kľúčovú úlohu v biomedicínskom výskume, najmä pri hodnotení cytotoxicity a testoch životaschopnosti buniek. Vďaka tomu sú nepostrádateľné pri testovaní účinnosti potenciálnych terapií rakoviny a látok, ktoré modulujú imunitnú odpoveď. Použitím buniek Jurkat môžu vedci dôkladne analyzovať účinky cytotoxických zlúčenín na integritu a funkciu bunkovej membrány vrátane aspektov súvisiacich s priepustnosťou bunkovej membrány a jej transportnými vlastnosťami.

Okrem toho prítomnosť mutácií v géne Lck v bunkách Jurkat, ktorá vedie k trvalej aktivácii T-buniek, poskytuje jedinečný model na hĺbkové štúdie aktivácie T-buniek a signálnych dráh. To je nevyhnutné na pochopenie komplexných procesov aktivácie lymfocytov, ktoré zahŕňajú bunkový cyklus, bunkový rast a diferenciáciu. Takéto poznatky sú kľúčové pre vývoj stratégií na moduláciu imunitných reakcií pri rôznych ochoreniach.

Vytvorenie špecifického derivátu buniek Jurkat, známeho ako Jurkat E6.1, výrazne posunulo naše chápanie bunkových mechanizmov. Tento derivát ponúka zdokonalený nástroj na skúmanie nuáns správania bunkových membrán a fyziologických reakcií jednotlivých buniek v experimentálnych podmienkach. Pomocou buniek Jurkat E6.1 sa výskumníkom podarilo objasniť základné bunkové procesy a ich dôsledky pre zdravie a choroby.

Celkovo možno povedať, že bunky Jurkat slúžia ako neoceniteľné nástroje v širokej škále výskumných oblastí, od biológie rakoviny po štúdie infekcie HIV, a ponúkajú pohľad na bunkovú biológiu, funkciu imunitného systému a potenciálne terapeutické zásahy.

Tkanivo
Krv
Choroba
T-bunková akútna lymfoblastická leukémia
Miesto metastáz
Periférna krv
Aplikácie
Výskum biológie T-buniek, vývoj T-bunkovej terapie, štúdium aktivácie a signalizácie T-buniek, testovanie účinnosti liekov (napr. inhibítorov kináz), výskum rakoviny so zameraním na T-bunkovú akútnu lymfoblastickú leukémiu.
Synonymá
  • JURKAT
  • JM
  • JM-Jurkat
  • Jurkat-FHCRC
  • Jurkat FHCRC
  • FHCRC-11
  • FHCRC subclone 11
  • FCCH1024

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Lymfoblast
Karyotyp
Bunková línia Jurkat je hypotetraploidná s plochým modálnym karyotypom 46 chromozómov a 7,8 % polyploidie.
Doba zdvojnásobenia
26 hodín

04Identifikátory

Citácia
Jurkat (katalógové číslo Cytion 302147)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0065

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
Bunky Jurkat exprimujú T-bunkový receptor (TCR) a proteíny CD3. Exprimujú aj ko-receptory CD4 a CD8, čo pomáha pri ich identifikácii ako pomocných alebo cytotoxických T-buniek.
Mutčný profil
U bunkovej línie Jurkat boli zistené genetické mutácie, ktoré ovplyvňujú najmä tri základné dráhy: Signalizáciu TCR, stabilitu genómu a glykozyláciu s väzbou O. V oblasti signalizácie TCR mutácie v PTEN, INPP5D, CTLA4 a SYK narúšajú normálne bunkové reakcie na aktiváciu receptora T-buniek, čo môže mať vplyv na proliferáciu a prežívanie. Stabilita genómu je narušená mutáciami v TP53, BAX a MSH2, čo vedie k narušeniu mechanizmov opravy DNA a zvýšenej náchylnosti k nádorovému bujneniu. Okrem toho mutácia v C1GALT1C1 narúša procesy O-viazanej glykozylácie, čo vedie k expresii skrátených O-glykánov [1]. Okrem toho majú Jurkat bunky bodovú mutáciu v géne Lck, ktorý kóduje proteín potrebný pre aktiváciu T-buniek, čo spôsobuje, že T-bunky sú konštitutívne aktivované. Odkazy: 1: 1. Gioia, L., Siddique, A., Head, S. R., Salomon, D. R., & Su, A. I. (2018). Celogenómový prieskum mutácií v bunkovej línii Jurkat. BMC genomics, 19, 1-13.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelne inaktivovaného FBS
Rozmnožovanie kultúr
Jemne homogenizujte bunkovú suspenziu v banke pipetovaním hore a dole, potom odoberte reprezentatívnu vzorku na stanovenie hustoty buniek na ml. Suspenziu zrieďte čerstvým kultivačným médiom, aby ste dosiahli koncentráciu buniek 1 x 105 buniek/ml, a upravenú suspenziu rozdeľte do nových baniek na ďalšie kultivovanie.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
14 rokov
Etnická príslušnosť
Európska