İmmortalize HK/FDC Hücreleri

Ölümsüzleştirilmiş HK/FDC hücre hattı, orijinal HK foliküler dendritik hücre benzeri hücrelerin genetik olarak stabilize edilmiş bir türevidir ve ana kültürün yaşlanma ile ilişkili sınırlamaları olmadan uzun süreli çoğalmayı mümkün kılarken, temel fenotipik ve fonksiyonel özelliklerini korur. Ölümsüzleştirme, replikatif durmayı atlayan tanımlanmış genetik unsurların eklenmesiyle gerçekleştirilmiştir ve bu da germinal merkez biyolojisi ve FDC-B hücre etkileşimlerinin tutarlı uzun vadeli çalışmalarını kolaylaştırmaktadır.

Ölümsüzleştirilmiş HK/FDC hücreleri, germinal merkez B hücrelerini bağlama ve ko-stimüle etme, hayatta kalmalarını destekleme ve anti-IgM veya CD40 ligasyonu gibi sinyallerin varlığında proliferasyonlarını artırma kapasitesini korur. Önemli olarak, VCAM-1 ve ICAM-1 dahil olmak üzere FDC'lerin karakteristik yapışma molekülleri ve kostimülatör faktörleri ifade etmeye devam ederler ve doğal FDC'lerin sağladığı mikroçevresel desteği taklit eden çözünür aracıları salgılarlar. Bu özellikler, ölümsüzleştirilmiş HK/FDC hattını, germinal merkezde B hücresi olgunlaşmasını, afinite seçimini ve hayatta kalmayı yöneten hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için sağlam ve tekrarlanabilir bir model haline getirir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın