Udødeliggjorte HK/FDC-celler

Den immortaliserte HK/FDC-cellelinjen er et genetisk stabilisert derivat av de opprinnelige HK-follikulære dendritiske cellelignende cellene, som beholder viktige fenotypiske og funksjonelle egenskaper samtidig som den muliggjør utvidet formering uten de aldersrelaterte begrensningene i den opprinnelige kulturen. Immortalisering ble oppnådd gjennom introduksjon av definerte genetiske elementer som omgår replikativ arrestasjon, noe som muliggjør konsistente langtidsstudier av germinal senterbiologi og FDC-B-celleinteraksjoner.

Immortaliserte HK/FDC-celler beholder evnen til å binde og co-stimulere germinale senter-B-celler, fremme deres overlevelse og øke deres proliferasjon i nærvær av signaler som anti-IgM eller CD40-ligering. Det er viktig å merke seg at de fortsetter å uttrykke adhesjonsmolekyler og kostimulerende faktorer som er karakteristiske for FDC-er, inkludert VCAM-1 og ICAM-1, og utskiller oppløselige mediatorer som etterligner den mikroøkologiske støtten som gis av naturlige FDC-er. Disse egenskapene gjør den immortaliserte HK/FDC-linjen til en robust og reproduserbar modell for å analysere de cellulære og molekylære mekanismene som styrer B-cellemodning, affinitetsseleksjon og overlevelse i germinalsenteret.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring