Geïmmortaliseerde HK/FDC-cellen

De geïmmortaliseerde HK/FDC-cellijn is een genetisch gestabiliseerd derivaat van de oorspronkelijke HK-folliculaire dendritische celachtige cellen, waarbij de belangrijkste fenotypische en functionele kenmerken behouden blijven en tegelijkertijd langdurige vermeerdering mogelijk is zonder de met senescentie samenhangende beperkingen van de oorspronkelijke kweek. De immortaliteit werd bereikt door de introductie van gedefinieerde genetische elementen die replicatieve arrestatie omzeilen, waardoor consistente langetermijnstudies van de biologie van kiemcentra en FDC-B-celinteracties mogelijk worden.

Onsterfelijke HK/FDC-cellen behouden het vermogen om kiemcentrum-B-cellen te binden en te co-stimuleren, hun overleving te bevorderen en hun proliferatie te versterken in aanwezigheid van signalen zoals anti-IgM of CD40-ligatie. Belangrijk is dat ze adhesiemoleculen en co-stimulerende factoren blijven uiten die kenmerkend zijn voor FDC's, waaronder VCAM-1 en ICAM-1, en oplosbare mediatoren afscheiden die de micro-omgevingsondersteuning van natuurlijke FDC's nabootsen. Deze eigenschappen maken de geïmmortaliseerde HK/FDC-lijn tot een robuust en reproduceerbaar model voor het ontleden van de cellulaire en moleculaire mechanismen die de rijping, affiniteitsselectie en overleving van B-cellen in het kiemcentrum regelen.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring