Prejsť na obsah
Immortalizované bunky HK/FDC
Tkanivo
Tonzily
Choroba
Folikulárne dendritické retikulum
Miesto metastáz
Neplatí (línia folikulárnych dendritických buniek; z mandlí)

Dokumenty

Immortalizované bunky HK/FDC

Cell line · Číslo výrobku 300205

Imortalizovaná bunková línia HK/FDC je geneticky stabilizovaný derivát pôvodných buniek podobných folikulárnym dendritickým bunkám HK, ktorý si zachováva kľúčové fenotypové...

€2,500.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Imortalizovaná bunková línia HK/FDC je geneticky stabilizovaný derivát pôvodných buniek podobných folikulárnym dendritickým bunkám HK, ktorý si zachováva kľúčové fenotypové a funkčné charakteristiky a zároveň umožňuje rozšírené rozmnožovanie bez obmedzení spojených so starnutím rodičovskej kultúry. Imortalizácia bola dosiahnutá zavedením definovaných genetických prvkov, ktoré obchádzajú replikačné zastavenie, čo uľahčuje konzistentné dlhodobé štúdie biológie germinálnych centier a interakcií FDC-B buniek.

Imortalizované HK/FDC bunky si zachovávajú schopnosť viazať a ko-stimulovať B bunky germinálneho centra, podporovať ich prežitie a zvyšovať ich proliferáciu v prítomnosti signálov, ako je anti-IgM alebo CD40 ligácia. Dôležité je, že naďalej exprimujú adhézne molekuly a kostimulačné faktory charakteristické pre FDC, vrátane VCAM-1 a ICAM-1, a vylučujú rozpustné mediátory, ktoré napodobňujú mikroprostredie poskytované pôvodnými FDC. Tieto vlastnosti robia z imortalizovanej línie HK/FDC robustný a reprodukovateľný model na analýzu bunkových a molekulárnych mechanizmov riadiacich dozrievanie B buniek, selekciu afinity a prežitie v germinatívnom centre.

Tkanivo
Tonzily
Choroba
Folikulárne dendritické retikulum
Miesto metastáz
Neplatí (línia folikulárnych dendritických buniek; z mandlí)
Aplikácie
Biológia B-buniek v germinálnych centrách; interakcia medzi FDC a B-bunkami; prežívanie a proliferácia B-buniek; testy s podpornými bunkami pri lymfóme/leukémii; vírusová infekcia FDC

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This immortalized HK/FDC line contains an immortalizing construct (Cytion/Inscreenex). This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibróm
Typ bunky
Folikulárna dendritická bunka
Doba zdvojnásobenia
približne 24 až 48 hodín

04Identifikátory

Citácia
Immortalizované HK/FDC (katalógové číslo Cytion 300205)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_IY38

05Prejav a náchylnosť

Vírusy
Cytion, zvečnený spoločnosťou Inscreenex i.A.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Pomer rozdelenia
1 až 3
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buniek/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Dieťa
Etnická príslušnosť
Kaukazský