HK/FDC細胞

リンパ濾胞の胚中心における濾胞樹状細胞（FDC）の役割を調査するため、ヒト扁桃から濾胞樹状細胞（FDC）様細胞株（HK細胞）が樹立された。 HK細胞は当初、CD21、CD23、DRC-1、CD40、VCAM-1、ICAM-1、HJ2などのマーカーを発現していたが、培養開始後3日以内にDRC-1、CD21、CD23を失った。 形態学的・機能的にHK細胞は線維芽細胞とは異なり、特有の増殖要件を有する。B細胞には結合して増殖を促進するが、T細胞には結合しない。抗CD3抗体で刺激された活性化T細胞はHK細胞に結合し、表現型の変化を誘導するとともにその増殖を促進する。

HK細胞は特に濾胞中心（GC）B細胞に選択的に結合・刺激し、アポトーシスから救済する。抗μ抗体または抗CD40抗体の存在下でB細胞増殖を促進する。また共刺激活性に寄与する可溶性因子を産生する。表現型・機能解析から、HK細胞は濾胞樹状細胞（FDC）由来である可能性が示唆され、GC B細胞の成熟・分化を支持する潜在的役割が浮き彫りとなった。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。