Přejít na obsah
HK/FDC buňky
Tkáň
Ústní dutina, mandle
Nemoc
Neonoplastická linie folikulárních dendritických buněk
Synonyma
FDC/HK

Dokumenty

HK/FDC buňky

Cell line · Číslo výrobku 300204

Imortalizované verze těchto buněk podobných HK/FDC jsou nyní k dispozici také...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Na zakázku
1

01Obecné informace

Popis
Nyní jsou k dispozici také imortalizované verze těchto buněk podobných HK/FDC, které představují stabilnější a škálovatelnější nástroj pro dlouhodobé studie funkce FDC a interakcí B buněk.

Buněčné linie podobné folikulárním dendritickým buňkám (FDC) (HK buňky) z lidských mandlí byly vytvořeny za účelem zkoumání role FDC v germinálních centrech lymfoidních folikulů. Zpočátku buňky HK exprimovaly markery jako CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 a HJ2, ale během tří dnů kultivace ztratily DRC-1, CD21 a CD23. Morfologicky a funkčně se HK buňky liší od fibroblastů a mají jedinečné požadavky na růst. Vazbou na B buňky podporují jejich proliferaci, ale nevazbou na T buňky. Aktivované T buňky, stimulované protilátkami anti-CD3, se vážou na HK buňky, vyvolávají fenotypové změny a podporují jejich růst.

HK buňky se preferenčně vážou a stimulují B buňky germinálního centra (GC), čímž je zachraňují před apoptózou. Zvyšují proliferaci B buněk v přítomnosti anti-mu nebo anti-CD40. Tyto buňky také produkují rozpustné faktory, které přispívají k jejich kostimulační aktivitě. Fenotypové a funkční analýzy naznačují, že HK buňky mohou pocházet z FDC, což zdůrazňuje jejich potenciální roli při podpoře zrání a diferenciace B buněk GC.

Tkáň
Ústní dutina, mandle
Nemoc
Neonoplastická linie folikulárních dendritických buněk
Aplikace
Živná buňka pro růst normálních B lymfocytů a lymfomů/leukemií. Studie vývoje B buněk v zárodečných centrech lymfatických uzlin. Možný výzkum virové infekce FDC
Synonyma
  • FDC/HK

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o statusu GMO
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroidní
Typ buňky
Folikulární dendritická buňka
Doba zdvojnásobení
cca 24–36 hodin

04Identifikátory

Citace
HK/FDC (katalogové číslo Cytion 300204)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_IY38

05Exprese a náchylnost

Povrchové antigeny
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
1 až 2krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Dítě
Etnická příslušnost
Kavkazský