Премини към съдържанието
HK/FDC клетки
Тъкан
Устна кухина, сливици
Заболяване
Ненеопластична клетъчна линия от фоликуларни дендритни клетки
Синоними
FDC/HK

Документи

HK/FDC клетки

Cell line · Номер на продукта 300204

Вече са налични и имунологично стабилизирани версии на тези клетки, подобни на HK/FDC...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание
Вече са налични и иммортализирани версии на тезиHK/FDC-подобни клетки, които предлагат по-стабилен и мащабируем инструмент за дългосрочни проучвания на функцията на FDC и взаимодействията на В-клетките.

Клетъчни линии, подобни на фоликулярни дендритни клетки (FDC) (HK клетки) от човешки сливици, бяха създадени, за да се проучи ролята на FDC в зародишните центрове на лимфоидните фоликули. Първоначално HK клетките изразяваха маркери като CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 и HJ2, но загубиха DRC-1, CD21 и CD23 в рамките на три дни от култивирането. Морфологично и функционално HK клетките се различават от фибробластите и имат уникални изисквания за растеж. Те се свързват с В клетки, подпомагайки тяхното размножаване, но не и с Т клетки. Активираните Т клетки, стимулирани с анти-CD3 антитела, се свързват с HK клетки, предизвиквайки фенотипни промени и насърчавайки техния растеж.

HK клетките се свързват предимно и стимулират В-клетките на зародишния център (GC), спасявайки ги от апоптоза. Те подобряват пролиферацията на В-клетките в присъствието на анти-mu или анти-CD40. Тези клетки също произвеждат разтворими фактори, които допринасят за тяхната костимулираща активност. Фенотипните и функционалните анализи предполагат, че HK клетките могат да произхождат от FDC, подчертавайки тяхната потенциална роля в подпомагането на зреенето и диференциацията на GC В-клетките.

Тъкан
Устна кухина, сливици
Заболяване
Ненеопластична клетъчна линия от фоликуларни дендритни клетки
Приложения
Хранителна клетка за растежа на нормални В лимфоцити и лимфоми/левкемии. Проучвания върху развитието на В клетките в герминативните центрове на лимфните възли. Възможни изследвания на вирусната инфекция на FDC
Синоними
  • FDC/HK

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Не е посочено
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
Без ГМО
Подробности относно статуса на ГМО
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Фиброзна
Тип клетка
Фоликуларна дендритна клетка
Време за удвояване
около 24–36 часа

04Идентификатори

Източник
HK/FDC (каталожен номер 300204 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_IY38

05Проява и предразположеност

Повърхностни антигени
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 3
Плътност на засяването
1 до 3 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
1 до 2 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Дете
Етническа принадлежност
Кавказки