Prejsť na obsah
Bunky HK/FDC
Tkanivo
Ústna dutina, mandle
Choroba
Neonoplastická línia folikulárnych dendritických buniek
Synonymá
FDC/HK

Dokumenty

Bunky HK/FDC

Cell line · Číslo výrobku 300204

Imortalizované verzie týchto buniek podobných HK/FDC sú teraz k dispozícii aj...

€800.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na objednávku
1

01Všeobecné informácie

Popis
V súčasnosti sú k dispozícii aj imortalizované verzie týchto buniek podobných HK/FDC, ktoré ponúkajú stabilnejší a škálovateľnejší nástroj pre dlhodobé štúdie funkcie FDC a interakcií B buniek.

Bunky podobné folikulárnym dendritickým bunkám (FDC) (HK bunky) z ľudských mandlí boli vytvorené na účely skúmania úlohy FDC v germinálnych centrách lymfoidných folikulov. Spočiatku HK bunky exprimovali markery ako CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 a HJ2, ale do troch dní kultivácie stratili DRC-1, CD21 a CD23. Morfológicky a funkčne sa HK bunky odlišujú od fibroblastov a majú jedinečné požiadavky na rast. Viažu sa na B bunky, podporujú ich proliferáciu, ale nie na T bunky. Aktivované T bunky, stimulované protilátkami anti-CD3, sa viažu na HK bunky, indukujú fenotypové zmeny a podporujú ich rast.

HK bunky sa preferenčne viažu a stimulujú B bunky germinálneho centra (GC), čím ich zachraňujú pred apoptózou. Zvyšujú proliferáciu B buniek v prítomnosti anti-mu alebo anti-CD40. Tieto bunky tiež produkujú rozpustné faktory, ktoré prispievajú k ich kostimulačnej aktivite. Fenotypové a funkčné analýzy naznačujú, že HK bunky môžu pochádzať z FDC, čo zdôrazňuje ich potenciálnu úlohu v podpore dozrievania a diferenciácie B buniek GC.

Tkanivo
Ústna dutina, mandle
Choroba
Neonoplastická línia folikulárnych dendritických buniek
Aplikácie
Napájacia bunka pre rast normálnych B lymfocytov a lymfómov/leukémií. Štúdie o vývoji B-buniek v zárodočných centrách lymfatických uzlín. Prípadne výskum vírusovej infekcie FDC
Synonymá
  • FDC/HK

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o štatúte GMO
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibróm
Typ bunky
Folikulárna dendritická bunka
Doba zdvojnásobenia
cca 24–36 hodín

04Identifikátory

Citácia
HK/FDC (katalógové číslo Cytion 300204)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_IY38

05Prejav a náchylnosť

Povrchové antigény
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Pomer rozdelenia
1 až 3
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
1 až 2-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Dieťa
Etnická príslušnosť
Kaukazský