Langsung ke isi
Sel HK / FDC
Tisu
Rongga mulut, amandel
Penyakit
Baris sel dendritik folikuler non-neoplastik
Sinonim
FDC/HK

Sel HK / FDC

Cell line · Nomor produk 300204

Versi sel yang diimortalkan yang mirip dengan sel HK/FDC kini juga tersedia...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Dibuat sesuai pesanan
1

01Informasi umum

Deskripsi
Versi abadi dari sel-sel serupa HK/FDC ini kini juga tersedia, menawarkan alat yang lebih stabil dan skalabel untuk studi jangka panjang mengenai fungsi FDC dan interaksi sel B.

Baris sel serupa sel dendritik folikular (FDC) (sel HK) dari amandel manusia telah dikembangkan untuk menyelidiki peran FDC dalam pusat germinal folikel limfoid. Awalnya, sel HK mengekspresikan penanda seperti CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1, dan HJ2, tetapi kehilangan DRC-1, CD21, dan CD23 dalam tiga hari pertama kultur. Secara morfologis dan fungsional, sel HK berbeda dari fibroblas dan memiliki persyaratan pertumbuhan yang unik. Mereka mengikat sel B, mendukung proliferasi mereka, tetapi tidak mengikat sel T. Sel T yang diaktifkan, yang dirangsang dengan antibodi anti-CD3, mengikat sel HK, memicu perubahan fenotipik dan mempromosikan pertumbuhan mereka.

Sel HK secara preferensial berikatan dan merangsang sel B pusat germinal (GC), menyelamatkan mereka dari apoptosis. Mereka meningkatkan proliferasi sel B dalam kehadiran antibodi anti-mu atau anti-CD40. Sel-sel ini juga memproduksi faktor larut yang berkontribusi pada aktivitas kostimulatorik mereka. Analisis fenotipik dan fungsional menyarankan bahwa sel HK mungkin berasal dari sel dendritik folikular (FDC), menyoroti peran potensial mereka dalam mendukung maturasi dan diferensiasi sel B pusat germinal.

Tisu
Rongga mulut, amandel
Penyakit
Baris sel dendritik folikuler non-neoplastik
Aplikasi
Sel pengumpan untuk pertumbuhan limfosit B normal dan limfoma/leukemia. Studi tentang perkembangan sel B di pusat germinal kelenjar getah bening. Kemungkinan penelitian tentang infeksi virus pada FDC
Sinonim
  • FDC/HK

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Tidak ditentukan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
Bebas Transgenik
Rincian status GMO
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Fibroidal
Jenis sel
Sel dendritik folikuler
Waktu penggandaan
sekitar 24–36 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
HK/FDC (nomor katalog Cytion 300204)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_IY38

05Ekspresi dan kerentanan

Antigen permukaan
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Rasio pemisahan
1 sampai 3
Kepadatan penanaman
1 hingga 3 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
1 hingga 2 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Anak
Etnis
Kaukasia