
- Doku
- Ağız boşluğu, bademcik
- Hastalık
- Neoplastik olmayan foliküler dendritik hücre hattı
- Eş anlamlılar
- FDC/HK
Belgeler
HK/FDC Hücreleri
Cell line · Ürün numarası 300204
Bu HK/FDC benzeri hücrelerin ölümsüzleştirilmiş versiyonları artık da mevcut...
Kişiselleştirme / Öneriler
- HK/FDC HücreleriCell line€800.00
01Genel bilgiler
- Açıklama
- BuHK/FDC benzeri hücrelerin ölümsüzleştirilmiş versiyonları da artık mevcuttur ve FDC fonksiyonu ve B hücresi etkileşimlerinin uzun vadeli çalışmaları için daha istikrarlı ve ölçeklenebilir bir araç sunmaktadır.
Lenf bezlerinin germinal merkezlerinde FDC'nin rolünü araştırmak için insan bademciklerinden foliküler dendritik hücre (FDC) benzeri hücre hatları (HK hücreleri) oluşturulmuştur. Başlangıçta HK hücreleri CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 ve HJ2 gibi belirteçleri ifade ediyordu, ancak kültürün üçüncü gününde DRC-1, CD21 ve CD23'ü kaybetti. Morfolojik ve fonksiyonel olarak, HK hücreleri fibroblastlardan farklıdır ve benzersiz büyüme gereksinimleri vardır. B hücrelerine bağlanarak çoğalmalarını desteklerler, ancak T hücrelerine bağlanmazlar. Anti-CD3 antikorları ile uyarılan aktive T hücreleri, HK hücrelerine bağlanarak fenotipik değişiklikleri indükler ve büyümelerini teşvik eder.
HK hücreleri, germinal merkez (GC) B hücrelerine tercihli olarak bağlanır ve bunları uyararak apoptozdan kurtarır. Anti-mu veya anti-CD40 varlığında B hücrelerinin çoğalmasını artırırlar. Bu hücreler ayrıca, kostimülatör aktivitesine katkıda bulunan çözünür faktörler üretir. Fenotipik ve fonksiyonel analizler, HK hücrelerinin FDC'lerden türetilmiş olabileceğini ve GC B hücrelerinin olgunlaşmasını ve farklılaşmasını desteklemedeki potansiyel rolünü vurgulamaktadır.
- Doku
- Ağız boşluğu, bademcik
- Hastalık
- Neoplastik olmayan foliküler dendritik hücre hattı
- Uygulamalar
- Normal B lenfositlerinin ve lenfomaların/lösemilerin büyümesi için besleyici hücre. Lenf düğümlerinin germinal merkezlerinde B hücresi gelişimi üzerine çalışmalar. Muhtemelen FDC'lerin virüs enfeksiyonu üzerine araştırma
- Eş anlamlılar
- FDC/HK
02Sınıflandırma
- Canlı
- İnsan
- Cinsiyet
- Belirtilmemiş
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- GDO durumu
- GDO'suz
- GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
- No genetic modification; wildtype immortalized cell line
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Morfoloji
- Fibroidal
- Hücre türü
- Foliküler dendritik hücre
- İki katına çıkma süresi
- yaklaşık 24-36 saat
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- HK/FDC (Cytion katalog numarası 300204)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_IY38
05İfade ve duyarlılık
- Yüzey antijenleri
- CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+
06İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Bölünme oranı
- 1'den 3'e kadar
- Ekim yoğunluğu
- 1 ila 3 x 104 hücre/cm2
- Sıvı değişimi
- haftada 1 ila 2 kez
- Çözülme sonrası toparlanma
- Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
08Bağışçı
- Bağışçının yaşı
- Çocuk
- Etnik köken
- Kafkas
09Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Malzeme Transfer Anlaşması gereklidir
- Evet