İçeriğe atla
HK/FDC Hücreleri
Doku
Ağız boşluğu, bademcik
Hastalık
Neoplastik olmayan foliküler dendritik hücre hattı
Eş anlamlılar
FDC/HK

HK/FDC Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300204

Bu HK/FDC benzeri hücrelerin ölümsüzleştirilmiş versiyonları artık da mevcut...

€800.00vergi ve kargo hariç
Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama
BuHK/FDC benzeri hücrelerin ölümsüzleştirilmiş versiyonları da artık mevcuttur ve FDC fonksiyonu ve B hücresi etkileşimlerinin uzun vadeli çalışmaları için daha istikrarlı ve ölçeklenebilir bir araç sunmaktadır.

Lenf bezlerinin germinal merkezlerinde FDC'nin rolünü araştırmak için insan bademciklerinden foliküler dendritik hücre (FDC) benzeri hücre hatları (HK hücreleri) oluşturulmuştur. Başlangıçta HK hücreleri CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 ve HJ2 gibi belirteçleri ifade ediyordu, ancak kültürün üçüncü gününde DRC-1, CD21 ve CD23'ü kaybetti. Morfolojik ve fonksiyonel olarak, HK hücreleri fibroblastlardan farklıdır ve benzersiz büyüme gereksinimleri vardır. B hücrelerine bağlanarak çoğalmalarını desteklerler, ancak T hücrelerine bağlanmazlar. Anti-CD3 antikorları ile uyarılan aktive T hücreleri, HK hücrelerine bağlanarak fenotipik değişiklikleri indükler ve büyümelerini teşvik eder.

HK hücreleri, germinal merkez (GC) B hücrelerine tercihli olarak bağlanır ve bunları uyararak apoptozdan kurtarır. Anti-mu veya anti-CD40 varlığında B hücrelerinin çoğalmasını artırırlar. Bu hücreler ayrıca, kostimülatör aktivitesine katkıda bulunan çözünür faktörler üretir. Fenotipik ve fonksiyonel analizler, HK hücrelerinin FDC'lerden türetilmiş olabileceğini ve GC B hücrelerinin olgunlaşmasını ve farklılaşmasını desteklemedeki potansiyel rolünü vurgulamaktadır.

Doku
Ağız boşluğu, bademcik
Hastalık
Neoplastik olmayan foliküler dendritik hücre hattı
Uygulamalar
Normal B lenfositlerinin ve lenfomaların/lösemilerin büyümesi için besleyici hücre. Lenf düğümlerinin germinal merkezlerinde B hücresi gelişimi üzerine çalışmalar. Muhtemelen FDC'lerin virüs enfeksiyonu üzerine araştırma
Eş anlamlılar
  • FDC/HK

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Belirtilmemiş
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GDO'suz
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroidal
Hücre türü
Foliküler dendritik hücre
İki katına çıkma süresi
yaklaşık 24-36 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HK/FDC (Cytion katalog numarası 300204)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_IY38

05İfade ve duyarlılık

Yüzey antijenleri
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 1 ila 2 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Çocuk
Etnik köken
Kafkas