Перейти до вмісту
Клітини HK/FDC
Тканина
Порожнина рота, мигдалини
Хвороба
Непухлинна лінія фолікулярних дендритних клітин
Синоніми
FDC/HK

Документи

Клітини HK/FDC

Cell line · Номер товару 300204

Імунізовані версії цих клітин, схожих на HK/FDC, тепер також доступні...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис
Зараз також доступні імморталізовані версії цих клітин, схожих на HK/FDC, що є більш стабільним і масштабованим інструментом для довгострокових досліджень функції FDC та взаємодії В-клітин.

Клітинні лінії, подібні до фолікулярних дендритних клітин (FDC) (клітини HK), були створені з людських мигдалин для дослідження ролі FDC у зародкових центрах лімфоїдних фолікулів. Спочатку клітини HK експресували маркери, такі як CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 та HJ2, але втратили DRC-1, CD21 та CD23 протягом трьох днів культивування. Морфологічно та функціонально клітини HK відрізняються від фібробластів і мають унікальні вимоги до росту. Вони зв'язуються з В-клітинами, підтримуючи їх проліферацію, але не з Т-клітинами. Активовані Т-клітини, стимульовані антитілами до CD3, зв'язуються з клітинами HK, індукуючи фенотипічні зміни та сприяючи їх росту.

HK-клітини переважно зв'язуються і стимулюють В-клітини гермінального центру (GC), рятуючи їх від апоптозу. Вони посилюють проліферацію В-клітин у присутності анти-му або анти-CD40. Ці клітини також продукують розчинні фактори, які сприяють їх костимулюючій активності. Фенотипічний та функціональний аналізи свідчать про те, що HK-клітини можуть походити від FDC, підкреслюючи їх потенційну роль у підтримці дозрівання та диференціації В-клітин GC.

Тканина
Порожнина рота, мигдалини
Хвороба
Непухлинна лінія фолікулярних дендритних клітин
Застосування
Живильна клітина для росту нормальних В-лімфоцитів та лімфом/лейкозів. Дослідження розвитку В-клітин у гермінативних центрах лімфатичних вузлів. Можливе дослідження вірусної інфекції ФДК
Синоніми
  • FDC/HK

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Не вказано
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
Без ГМО
Детальна інформація щодо статусу ГМО
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Фіброміома
Тип клітини
Фолікулярна дендритна клітина
Час подвоєння
приблизно 24–36 годин

04Ідентифікатори

Посилання
HK/FDC (номер за каталогом Cytion 300204)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_IY38

05Експресія та сприйнятливість

Поверхневі антигени
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Коефіцієнт розподілу
від 1 до 3
Щільність висіву
Від 1 до 3 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
1-2 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
Дитинко
Етнічна приналежність
Кавказець