Pereiti prie turinio
HK/FDC ląstelės
Audinys
Burnos ertmė, tonzilės
Liga
Neonoplastinė folikulinė dendritinių ląstelių linija
Sinonimai
FDC/HK

Dokumentai

HK/FDC ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300204

Dabar taip pat galima įsigyti šių HK/FDC tipo ląstelių nemirtingas versijas...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Pagaminta pagal užsakymą
1

01Bendra informacija

Aprašymas
Dabar taip pat yra prieinamos šiųHK/FDC tipo ląstelių nemirtingos versijos, kurios yra stabilesnis ir labiau pritaikomas įrankis ilgalaikiams FDC funkcijos ir B ląstelių sąveikos tyrimams.

Folikulinės dendritinės ląstelės (FDC) tipo ląstelių linijos (HK ląstelės) iš žmogaus tonzilių buvo sukurtos siekiant ištirti FDC vaidmenį limfoidinių folikulų gemalinėse centruose. Iš pradžių HK ląstelės ekspresavo žymeklius, tokius kaip CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 ir HJ2, bet per tris kultivavimo dienas prarado DRC-1, CD21 ir CD23. Morfologiškai ir funkciniu požiūriu HK ląstelės skiriasi nuo fibroblastų ir turi unikalius augimo reikalavimus. Jos jungiasi prie B ląstelių, remdamos jų proliferaciją, bet ne prie T ląstelių. Aktyvuotos T ląstelės, stimuliuojamos anti-CD3 antikūnais, jungiasi prie HK ląstelių, sukeldamos fenotipinius pokyčius ir skatindamos jų augimą.

HK ląstelės pirmenybine tvarka jungiasi prie germinalinio centro (GC) B ląstelių ir jas stimuliuoja, apsaugodamos jas nuo apoptozės. Jos stiprina B ląstelių proliferaciją esant anti-mu arba anti-CD40. Šios ląstelės taip pat gamina tirpius veiksnius, kurie prisideda prie jų kostimuliuojančios veiklos. Fenotipinės ir funkcinės analizės rodo, kad HK ląstelės gali būti kilusios iš FDC, pabrėžiant jų potencialų vaidmenį palaikant GC B ląstelių brendimą ir diferenciaciją.

Audinys
Burnos ertmė, tonzilės
Liga
Neonoplastinė folikulinė dendritinių ląstelių linija
Paraiškos
Normalių B limfocitų ir limfomų/leukemijų augimo maitinančioji ląstelė. B ląstelių vystymosi limfmazgių germinaliuose centruose tyrimai. Galimi FDC virusinės infekcijos tyrimai
Sinonimai
  • FDC/HK

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
Be GMO
Išsami informacija apie GMO statusą
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Fibroidinis
Ląstelių tipas
Folikulinės dendritinės ląstelės
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug 24–36 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
HK/FDC (Cytion katalogo numeris 300204)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_IY38

05Išraiška ir jautrumas

Paviršiaus antigenai
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
1–3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
1-2 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Vaikas
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių