
- Weefsel
- Mondholte, amandel
- Ziekte
- Niet-neoplastische folliculaire dendritische cellijn
- Synoniemen
- FDC/HK
Documenten
HK/FDC Cellen
Cell line · Productnummer 300204
Er zijn nu ook onsterfbaar gemaakte versies van deze HK/FDC-achtige cellen beschikbaar...
Maatwerk / Aanbevelingen
- HK/FDC CellenCell line€800.00
01Algemene informatie
- Beschrijving
- Er zijn nu ook geïmmortaliseerde versies van dezeHK/FDC-achtige cellen beschikbaar, die een stabieler en schaalbaarder hulpmiddel bieden voor langetermijnonderzoek naar de functie van FDC's en interacties met B-cellen.
Folliculaire dendritische cel (FDC)-achtige cellijnen (HK-cellen) uit menselijke amandelen werden opgezet om de rol van FDC in kiemcentra van lymfoïde follikels te onderzoeken. Aanvankelijk brachten HK-cellen markers tot expressie zoals CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 en HJ2, maar binnen drie dagen na kweek verloren ze DRC-1, CD21 en CD23. Morfologisch en functioneel verschillen HK-cellen van fibroblasten en hebben ze unieke groeibehoeften. Ze binden zich aan B-cellen en ondersteunen hun proliferatie, maar niet aan T-cellen. Geactiveerde T-cellen, gestimuleerd met anti-CD3-antilichamen, binden zich aan HK-cellen, waardoor fenotypische veranderingen worden geïnduceerd en hun groei wordt bevorderd.
HK-cellen binden bij voorkeur aan en stimuleren germinale centrum (GC) B-cellen, waardoor ze worden gered van apoptose. Ze versterken de proliferatie van B-cellen in aanwezigheid van anti-mu of anti-CD40. Deze cellen produceren ook oplosbare factoren die bijdragen aan hun co-stimulerende activiteit. Fenotypische en functionele analyses suggereren dat HK-cellen afkomstig kunnen zijn van FDC's, wat hun potentiële rol in het ondersteunen van de rijping en differentiatie van GC B-cellen benadrukt.
- Weefsel
- Mondholte, amandel
- Ziekte
- Niet-neoplastische folliculaire dendritische cellijn
- Toepassingen
- Voedende cel voor de groei van normale B-lymfocyten en lymfomen/leukemieën. Onderzoek naar de ontwikkeling van B-cellen in kiemcentra van lymfeklieren. Mogelijk onderzoek naar virusinfectie van FDC's
- Synoniemen
- FDC/HK
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Niet gespecificeerd
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- Zonder genetisch gemodificeerde organismen
- Details over de GGO-status
- No genetic modification; wildtype immortalized cell line
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Schildklier
- Celtype
- Folliculaire dendritische cel
- Verdubbelingstijd
- ongeveer 24-36 uur
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- HK/FDC (Cytion catalogusnummer 300204)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_IY38
05Expressie en vatbaarheid
- Oppervlakte-antigenen
- CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Splitsingsverhouding
- 1 tot en met 3
- Zaaidichtheid
- 1 tot 3 x 104 cellen/cm2
- Vloeistofverversing
- 1 tot 2 keer per week
- Herstel na ontdooiing
- Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Leeftijd van de donor
- Kind
- Etnische afkomst
- Kaukasisch
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja