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HK/FDC 셀
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구강, 편도선
질병
비종양성 여포 수지상 세포주
동의어
FDC/HK

HK/FDC 셀

Cell line · 제품 번호 300204

이러한 HK/FDC 유사 세포의 불멸화 버전도 이제 이용 가능합니다...

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1

01일반 정보

설명
이러한HK/FDC 유사 세포의 불멸화 버전도 현재 이용 가능하여, FDC 기능 및 B 세포 상호작용에 대한 장기 연구를 위한 보다 안정적이고 확장 가능한 도구를 제공합니다.

림프절의 생식소 중심에서 FDC의 역할을 연구하기 위해 인간 편도에서 유래한 여포수지상세포(FDC) 유사 세포주(HK 세포)가 확립되었습니다. 처음에 HK 세포는 CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 및 HJ2와 같은 마커를 발현했지만, 배양 3일 이내에 DRC-1, CD21 및 CD23을 상실했습니다. 형태학적으로 및 기능적으로 HK 세포는 섬유아세포와 구별되며 독특한 성장 요건을 가진다. 이들은 B 세포에 결합하여 증식을 지원하지만 T 세포에는 결합하지 않는다. 항-CD3 항체로 자극된 활성화된 T 세포는 HK 세포에 결합하여 표현형 변화를 유도하고 그 성장을 촉진한다.

HK 세포는 생식소(GC) B 세포를 선택적으로 결합 및 자극하여 세포 사멸로부터 구제합니다. 이들은 항-뮤(anti-mu) 또는 항-CD40 존재 하에서 B 세포 증식을 증진시킵니다. 또한 이 세포들은 공동 자극 활성에 기여하는 용해성 인자를 생성합니다. 표현형 및 기능 분석은 HK 세포가 FDC(생식소 유래 세포)에서 유래되었을 가능성을 시사하며, 이는 생식소 B 세포의 성숙 및 분화를 지원하는 잠재적 역할을 강조합니다.

티슈
구강, 편도선
질병
비종양성 여포 수지상 세포주
응용 분야
정상 B 림프구 및 림프종/백혈병의 성장을 위한 피더 세포. 림프절의 배아 중심에서의 B 세포 발달에 대한 연구. FDC의 바이러스 감염에 대한 연구 가능성
동의어
  • FDC/HK

02분류

생물체
인간
성
미지정
성장 특성
준수자
유전자 변형 여부
비유전자변형
유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
생물안전 등급
1

03특징

형태학
섬유종
세포 유형
여포 수지상 세포
배가 시간
약 24~36시간

04식별자

인용
HK/FDC(사이티온 카탈로그 번호 300204)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_IY38

05발현 및 감수성

표면 항원
CD14+, CD40+, ICAM-1+, V캠-1+

06취급 및 배양

배지
EMEM(MEM 이글), w: 2mM L-글루타민, w: 2.2g/L NaHCO3, w: EBSS(사이티온 제품 번호 820100a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS와 1% NEAA를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
분할 비율
1~3
파종 밀도
1~3 × 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 1~2회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
자식
민족
백인