Preskoči na vsebino
HK/FDC celice
Tkivo
Ustna votlina, tonzile
Bolezen
Linija ne-neoplastičnih folikularnih dendritičnih celic
Sinonimi
FDC/HK

Dokumenti

HK/FDC celice

Cell line · Številka izdelka 300204

Imortalizirane različice teh celic, podobnih HK/FDC, so zdaj na voljo tudi...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Po naročilu
1

01Splošne informacije

Opis
Sedaj so na voljo tudi nesmrne različice teh celic, podobnih HK/FDC, ki ponujajo stabilnejše in bolj prilagodljivo orodje za dolgoročne študije delovanja FDC in interakcij B-celic.

Celice, podobne folikularnim dendritskim celicam (FDC) (HK celice) iz človeških mandelj, so bile vzpostavljene za preučevanje vloge FDC v germinalnih centrih limfoidnih foliklov. Sprva so HK celice izražale markerje, kot so CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 in HJ2, vendar so v treh dneh kultiviranja izgubile DRC-1, CD21 in CD23. Morfološko in funkcionalno se HK celice razlikujejo od fibroblastov in imajo edinstvene zahteve za rast. Vežejo se na B celice in podpirajo njihovo proliferacijo, vendar se ne vežejo na T celice. Aktivirane T celice, stimulirane z anti-CD3 protitelesi, se vežejo na HK celice, kar povzroča fenotipske spremembe in spodbuja njihovo rast.

HK celice se prednostno vežejo in stimulirajo B celice germinalnega centra (GC), s čimer jih rešijo pred apoptozo. Povečajo proliferacijo B celic v prisotnosti anti-mu ali anti-CD40. Te celice proizvajajo tudi topne faktorje, ki prispevajo k njihovi kostimulativni aktivnosti. Fenotipske in funkcionalne analize kažejo, da HK celice lahko izhajajo iz FDC, kar poudarja njihovo potencialno vlogo pri podpori zorenja in diferenciacije GC B celic.

Tkivo
Ustna votlina, tonzile
Bolezen
Linija ne-neoplastičnih folikularnih dendritičnih celic
Uporaba
Hranilna celica za rast normalnih limfocitov B in limfomov/levkemij. Študije o razvoju celic B v germinalnih centrih bezgavk. Morebitne raziskave virusnih okužb FDC
Sinonimi
  • FDC/HK

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
Brez gensko spremenjenih organizmov
Podrobnosti o statusu GSO
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroidni
Vrsta celice
Folikularna dendritična celica
Čas podvojitve
približno 24–36 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HK/FDC (kataloška številka Cytion 300204)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_IY38

05Izražanje in dovzetnost

Površinski antigeni
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 3
Gostota setve
1 do 3 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
1 do 2-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Otrok
Etnična pripadnost
Kavkaški