Tartalomra ugrás
HK/FDC sejtek
Szövet
Szájüreg, mandula
Betegség
Nem neoplasztikus follikuláris dendritikus sejtvonal
Szinonimák
FDC/HK

Dokumentumok

HK/FDC sejtek

Cell line · Termékszám 300204

Ezeknek a HK/FDC-hez hasonló sejteknek az immortalizált változatai most már szintén elérhetők...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Rendelésre készül
1

01Általános információk

Leírás
Ezekneka HK/FDC-szerű sejteknek immortális változatai is elérhetők már, amelyek stabilabb és skálázhatóbb eszközt kínálnak az FDC funkciójának és a B-sejtek kölcsönhatásainak hosszú távú tanulmányozásához.

Az emberi mandulákból származó follikuláris dendritikus sejtekhez (FDC) hasonló sejtvonalakat (HK sejtek) hoztak létre, hogy megvizsgálják az FDC szerepét a limfoid follikulák germinális központjaiban. Kezdetben a HK sejtek olyan markereket expresszáltak, mint a CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 és HJ2, de három napos tenyésztés után elvesztették a DRC-1, CD21 és CD23 markereket. Morfológiailag és funkcionálisan a HK sejtek különböznek a fibroblasztoktól, és egyedi növekedési követelményeik vannak. A B sejtekhez kötődnek, támogatva azok proliferációját, de a T sejtekhez nem. Az anti-CD3 antitestekkel stimulált aktivált T sejtek kötődnek a HK sejtekhez, fenotípusbeli változásokat indukálva és növekedésüket elősegítve.

A HK sejtek előnyösen kötődnek a germinális centrum (GC) B sejtekhez és stimulálják azokat, megmentve őket az apoptózistól. Anti-mu vagy anti-CD40 jelenlétében fokozzák a B sejtek proliferációját. Ezek a sejtek oldható faktorokat is termelnek, amelyek hozzájárulnak ko-stimuláló aktivitásukhoz. A fenotípusos és funkcionális elemzések arra utalnak, hogy a HK sejtek FDC-kből származhatnak, kiemelve azok potenciális szerepét a GC B sejtek érésében és differenciálódásában.

Szövet
Szájüreg, mandula
Betegség
Nem neoplasztikus follikuláris dendritikus sejtvonal
Alkalmazások
A normál B-limfociták és a limfómák/leukémiák növekedésének tápsejtje. A nyirokcsomók csíraközpontjaiban a B-sejtek fejlődésével kapcsolatos vizsgálatok. Esetleg az FDC-k vírusfertőzésének kutatása
Szinonimák
  • FDC/HK

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroidális
Sejttípus
Follikuláris dendritikus sejt
Kettőzési idő
kb. 24–36 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HK/FDC (Cytion katalógusszám: 300204)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_IY38

05Kifejeződés és fogékonyság

Felszíni antigének
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+, VCAM-1+

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
1–3 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 1-2 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Gyermek
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi