Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα HK/FDC
Ιστός
Στοματική κοιλότητα, αμυγδαλές
Ασθένεια
Μη νεοπλασματική σειρά κυττάρων των θυλακικών δενδριτικών κυττάρων
Συνώνυμα
FDC/HK

Έγγραφα

Κύτταρα HK/FDC

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300204

Αθανατοποιημένες εκδόσεις αυτών των κυττάρων τύπου HK/FDC είναι πλέον επίσης διαθέσιμες...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Κατασκευάζεται κατόπιν παραγγελίας
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Αποθανατισμένες εκδοχές αυτών των HK/FDC-like κυττάρων είναι πλέον διαθέσιμες, προσφέροντας ένα πιο σταθερό και επεκτάσιμο εργαλείο για μακροχρόνιες μελέτες της λειτουργίας των FDC και των αλληλεπιδράσεων των Β κυττάρων.

Κυτταρικές σειρές τύπου Follicular dendritic cell (FDC) (κύτταρα HK) από ανθρώπινες αμυγδαλές δημιουργήθηκαν για να διερευνηθεί ο ρόλος των FDC στα βλαστικά κέντρα των λεμφοειδών ωοθυλακίων. Αρχικά, τα κύτταρα HK εξέφραζαν δείκτες όπως CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 και HJ2, αλλά έχασαν τα DRC-1, CD21 και CD23 εντός τριών ημερών από την καλλιέργεια. Μορφολογικά και λειτουργικά, τα κύτταρα HK διαφέρουν από τους ινοβλάστες και έχουν μοναδικές απαιτήσεις ανάπτυξης. Συνδέονται με τα κύτταρα Β, υποστηρίζοντας τον πολλαπλασιασμό τους, αλλά όχι με τα κύτταρα Τ. Τα ενεργοποιημένα κύτταρα Τ, που διεγείρονται με αντισώματα anti-CD3, συνδέονται με τα κύτταρα HK, προκαλώντας φαινοτυπικές αλλαγές και προωθώντας την ανάπτυξή τους.

Τα κύτταρα HK συνδέονται κατά προτίμηση και διεγείρουν τα κύτταρα Β του βλαστικού κέντρου (GC), διασώζοντάς τα από την απόπτωση. Ενισχύουν τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων Β παρουσία αντι-mu ή αντι-CD40. Αυτά τα κύτταρα παράγουν επίσης διαλυτούς παράγοντες που συμβάλλουν στη συνδιεγερτική τους δραστηριότητα. Οι φαινοτυπικές και λειτουργικές αναλύσεις υποδηλώνουν ότι τα κύτταρα HK μπορεί να προέρχονται από FDC, υπογραμμίζοντας τον πιθανό ρόλο τους στην υποστήριξη της ωρίμανσης και της διαφοροποίησης των κυττάρων Β του GC.

Ιστός
Στοματική κοιλότητα, αμυγδαλές
Ασθένεια
Μη νεοπλασματική σειρά κυττάρων των θυλακικών δενδριτικών κυττάρων
Εφαρμογές
Κύτταρο τροφοδότη για την ανάπτυξη φυσιολογικών λεμφοκυττάρων Β και λεμφωμάτων/λευχαιμιών. Μελέτες για την ανάπτυξη των Β κυττάρων στα βλαστικά κέντρα των λεμφαδένων. Ενδεχομένως έρευνα για τη μόλυνση των FDCs από ιούς
Συνώνυμα
  • FDC/HK

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Μη καθορισμένο
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
Χωρίς ΓΤΟ
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινομυώματα
Τύπος κυττάρου
Δενδριτικό κύτταρο θυλακίου
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 24-36 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HK/FDC (αριθμός καταλόγου Cytion 300204)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_IY38

05Έκφραση και ευαισθησία

Επιφανειακά αντιγόνα
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 3
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
1 έως 2 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Παιδί
Εθνικότητα
Καυκάσιος