HK/FDC-celler

Follikulära dendritiska celler (FDC)-liknande cellinjer (HK-celler) från humana tonsiller etablerades för att undersöka FDC:s roll i lymfoida folliklars germinala centra. Inledningsvis uttryckte HK-celler markörer som CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 och HJ2, men förlorade DRC-1, CD21 och CD23 inom tre dagar efter odling. Morfologiskt och funktionellt skiljer sig HK-celler från fibroblaster och har unika tillväxtkrav. De binder till B-celler och stöder deras proliferation, men inte till T-celler. Aktiverade T-celler, stimulerade med anti-CD3-antikroppar, binder till HK-celler, inducerar fenotypiska förändringar och främjar deras tillväxt.

HK-celler binder och stimulerar företrädesvis germinalcenter-B-celler (GC), vilket räddar dem från apoptos. De förstärker B-cellernas proliferation i närvaro av anti-mu eller anti-CD40. Dessa celler producerar också lösliga faktorer som bidrar till deras kostimulerande aktivitet. Fenotypiska och funktionella analyser tyder på att HK-celler kan härstamma från FDC, vilket understryker deras potentiella roll i att stödja mognaden och differentieringen av GC-B-celler.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring