Pāriet uz saturu
Immortalizētas HK/FDC šūnas
Audums
Tonsils
Slimība
Folikulārais dendrītiskais retikuls
Metastāžu vieta
Neattiecas (folikulāro dendrīto šūnu līnija; iegūta no mandelēm)

Dokumenti

Immortalizētas HK/FDC šūnas

Cell line · Preces numurs 300205

Imortalizētā HK/FDC šūnu līnija ir ģenētiski stabilizēts atvasinājums no sākotnējām HK folikulārajām dendrītiskajām šūnām, kas saglabā galvenās fenotipiskās...

€2,500.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Immortalizētā HK/FDC šūnu līnija ir ģenētiski stabilizēts atvasinājums no sākotnējām HK folikulāro dendrīto šūnu tipa šūnām, kas saglabā galvenās fenotipiskās un funkcionālās īpašības, vienlaikus nodrošinot ilgstošu pavairošanos bez vecuma izraisītiem ierobežojumiem, kas raksturīgi vecāku kultūrai. Immortalizācija tika panākta, ievadot noteiktus ģenētiskos elementus, kas apiet replikācijas apturēšanu, atvieglojot ilgtermiņa pētījumus par dzimumšūnu centru bioloģiju un FDC-B šūnu mijiedarbību.

Imortalizētās HK/FDC šūnas saglabā spēju saistīties un kopīgi stimulēt dzimumšūnu centru B šūnas, veicināt to izdzīvošanu un pastiprināt to proliferāciju tādu signālu klātbūtnē kā anti-IgM vai CD40 ligācija. Svarīgi, ka tās turpina ekspresēt FDC raksturīgās adhezijas molekulas un kostimulējošos faktorus, tostarp VCAM-1 un ICAM-1, un izdalīt šķīstošos mediatorus, kas imitē dabisko FDC nodrošināto mikroapstākļu atbalstu. Šīs īpašības padara imortalizēto HK/FDC līniju par stabilu un reproducējamu modeli, lai analizētu šūnu un molekulāros mehānismus, kas regulē B šūnu nobriešanu, afinitātes atlasi un izdzīvošanu dzimumšūnu centrā.

Audums
Tonsils
Slimība
Folikulārais dendrītiskais retikuls
Metastāžu vieta
Neattiecas (folikulāro dendrīto šūnu līnija; iegūta no mandelēm)
Pieteikumi
Germinālo centru B šūnu bioloģija; FDC un B šūnu mijiedarbība; B šūnu izdzīvošana un proliferācija; limfomas/leikēmijas barotājšūnu analīzes; FDC šūnu inficēšanās ar vīrusu

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This immortalized HK/FDC line contains an immortalizing construct (Cytion/Inscreenex). This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroīdi
Šūnu tips
Folikulārās dendrītšūnas
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 24 līdz 48 stundas

04Identifikatori

Atsauce
Immortalizēti HK/FDC (Cytion kataloga numurs 300205)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_IY38

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Cytion, iemūžināts ar Inscreenex i.A.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 × 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Bērns
Etniskā piederība
Kaukāzietis