Immortalizált HK/FDC sejtek

Az immortalizált HK/FDC sejtvonal az eredeti HK follikuláris dendritikus sejtekhez hasonló sejtek genetikailag stabilizált származéka, amely megőrzi a legfontosabb fenotípusos és funkcionális jellemzőket, miközben lehetővé teszi a szülői kultúra öregedéssel kapcsolatos korlátai nélküli kiterjesztett szaporodást. Az immortalizációt olyan meghatározott genetikai elemek bevezetésével érték el, amelyek megkerülik a replikációs leállást, megkönnyítve a germinális központ biológiájának és az FDC-B sejtek kölcsönhatásainak következetes, hosszú távú tanulmányozását.

Az immortalizált HK/FDC sejtek megőrzik azt a képességüket, hogy kötődjenek a germinális centrum B sejtjeihez és azokat ko-stimulálják, elősegítsék túlélésüket és fokozzák szaporodásukat olyan jelek jelenlétében, mint az anti-IgM vagy a CD40 ligáció. Fontos, hogy továbbra is expresszálják az FDC-kre jellemző adhéziós molekulákat és ko-stimuláló faktorokat, beleértve a VCAM-1-et és az ICAM-1-et, és szekretálnak oldható mediátorokat, amelyek utánozzák a natív FDC-k által biztosított mikroökológiai támogatást. Ezek a tulajdonságok az immortalizált HK/FDC vonalat robusztus és reprodukálható modellé teszik a B-sejtek érését, affinitás-szelekcióját és túlélését a germinális központban szabályozó sejt- és molekuláris mechanizmusok elemzéséhez.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban