Immortalisierte HK/FDC-Zellen

Die immortalisierte HK/FDC-Zelllinie ist ein genetisch stabilisiertes Derivat der ursprünglichen HK-Follikel-Dendritenzellen, das wichtige phänotypische und funktionelle Eigenschaften beibehält und gleichzeitig eine verlängerte Vermehrung ohne die mit der Seneszenz verbundenen Einschränkungen der Elternkultur ermöglicht. Die Immortalisierung wurde durch die Einführung definierter genetischer Elemente erreicht, die den Replikationsstillstand umgehen und so konsistente Langzeitstudien zur Biologie der Keimzentren und zu den Wechselwirkungen zwischen FDC- und B-Zellen ermöglichen.

Immortalisierte HK/FDC-Zellen behalten die Fähigkeit, B-Zellen des Keimzentrums zu binden und zu kostimulieren, ihr Überleben zu fördern und ihre Proliferation in Gegenwart von Signalen wie Anti-IgM oder CD40-Ligation zu verstärken. Wichtig ist, dass sie weiterhin Adhäsionsmoleküle und kostimulatorische Faktoren exprimieren, die für FDCs charakteristisch sind, darunter VCAM-1 und ICAM-1, und lösliche Mediatoren sekretieren, die die mikroumgebungsunterstützende Wirkung nativer FDCs nachahmen. Diese Eigenschaften machen die immortalisierte HK/FDC-Linie zu einem robusten und reproduzierbaren Modell für die Analyse der zellulären und molekularen Mechanismen, die die B-Zell-Reifung, die Affinitätsauswahl und das Überleben innerhalb des Keimzentrums steuern.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung