İçeriğe atla
HROC40
Doku
Kolon descendens, UICC IIIa
Hastalık
Primer adenokarsinom, TNM evresi T3N1M0R0L1V1, derecelendirme G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

Belgeler

HROC40

Cell line · Ürün numarası 300822

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama
Bu, 2006 yılından beri PD Dr. Michael Linnebacher tarafından Primer CRC rezeksiyon örneklerinden oluşturulan bir dizi tümör hücre hattından biridir.
Doku
Kolon descendens, UICC IIIa
Hastalık
Primer adenokarsinom, TNM evresi T3N1M0R0L1V1, derecelendirme G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, bağışıklık sistemi baskılanmış çıplak farelerde
Ploidi durumu
Aneuploid
MSI durumu
MSS

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HROC40 (Cytion katalog numarası 300822)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1G01

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Beta-aktin, osteopontin düşük, Toll benzeri reseptör (TLR) 3 orta, TLR4 orta, TLR7 düşük, TLR8 -, PTEN
Antijen ekspresyonu
CD326+, CD44+, CD15+, CD71+, CD73+, CD274+, CD47+, CD54+, CD95+, CD276+, CD133- , CD66acdeweak, IDO+, cFLIP+, MHC-I+, IFN-y tedavisi sonrası MHCIIweak, EpCAM+
Mutasyon profili
P53G266e, APCwt, K-RasG13D, mt13, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt
Virüsler
İnsan patojenik virüsleri SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV içermez.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Çözüldükten sonra hücre peletini dikkatlice yeniden süspanse edin. 300 x g'de 3 dakika santrifüjleyin ve süpernatantı atın. 2x 25 cm² hücre kültürü şişelerine tohumlayın ve şişeleri inkübatörde 48 saat bekletin. 80-90 konfluensiye ulaşılana kadar harcanan ortamı her 2-3 günde bir değiştirin. Bu işlem yaklaşık 10-14 gün sürecektir.
Ekim yoğunluğu
Çözüldükten sonra 5x104 hücre/cm2, hücreler hızla çoğaldıktan sonra 3x104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
Her 3 ila 5 günde bir
Çözülme sonrası toparlanma
Hızlı
Çözme ve kültürleme

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
69 yıl
Etnik köken
Kafkas