Prejsť na obsah
HROC40
Tkanivo
Colon descendens, UICC IIIa
Choroba
Primárny adenokarcinóm, TNM štádium T3N1M0R0L1V1, grading G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

Dokumenty

HROC40

Cell line · Číslo výrobku 300822

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis
Ide o jednu zo série nádorových bunkových línií, ktoré od roku 2006 vytvoril Dr. Michael Linnebacher zo vzoriek primárnych resekátov CRC.
Tkanivo
Colon descendens, UICC IIIa
Choroba
Primárny adenokarcinóm, TNM štádium T3N1M0R0L1V1, grading G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, u imunosuprimovaných nahých myší
Ploidný stav
Aneuploidné
Stav MSI
MSS

04Identifikátory

Citácia
HROC40 (katalógové číslo Cytion 300822)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1G01

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Beta-aktín, osteopontín nízky, Toll-like receptor (TLR) 3 stredný, TLR4 stredný, TLR7 nízky, TLR8 -, PTEN
Expresia antigénu
CD326+, CD44+, CD15+, CD71+, CD73+, CD274+, CD47+, CD54+, CD95+, CD276+, CD133- , CD66acdeweak, IDO+, cFLIP+, MHC-I+, MHCIIweak po liečbe IFN-y, EpCAM+
Mutčný profil
P53G266e, APCwt, K-RasG13D, mt13, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt
Vírusy
Neobsahuje ľudské patogénne vírusy SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Po rozmrazení opatrne resuspendujte bunkovú peletu. Centrifugujte pri 300 x g počas 3 minút a supernatant zlikvidujte. Nasaďte bunky do baniek s veľkosťou 2x 25 cm² a nechajte banky 48 hodín v inkubátore. Každé 2 - 3 dni vymeňte použité médium, kým sa nedosiahne 80 - 90 % konfluencia. To bude trvať približne 10 - 14 dní.
Hustota výsevu
5x104 buniek/cm2 po rozmrazení, 3x104 buniek/cm2 po intenzívnom rozmnožovaní buniek
Obnova kvapaliny
Každých 3 až 5 dní
Zotavenie po rozmrazení
Rýchle
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
69 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský