Pāriet uz saturu
HROC40
Audums
Colon descendens, UICC IIIa
Slimība
Primārā adenokarcinoma, TNM stadija T3N1M0R0L1V1, gradings G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

Dokumenti

HROC40

Cell line · Preces numurs 300822

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts
Šī ir viena no šūnu līnijām, kas ir viena no virknes audzēja šūnu līnijām, kuras kopš 2006. gada ir izveidojis Dr. Michael Linnebacher no primāro CRC rezekciju paraugiem.
Audums
Colon descendens, UICC IIIa
Slimība
Primārā adenokarcinoma, TNM stadija T3N1M0R0L1V1, gradings G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, imunitāti nomācošām kailām pelēm
Ploidijas statuss
Aneuploīds
MSI statuss
MSS

04Identifikatori

Atsauce
HROC40 (Cytion kataloga numurs 300822)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1G01

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Betaaktīns, osteopontīns zems, Toll līdzīgs receptoris (TLR) 3 mērens, TLR4 mērens, TLR7 zems, TLR8 -, PTEN
Antigēna ekspresija
CD326+, CD44+, CD15+, CD71+, CD73+, CD274+, CD47+, CD54+, CD95+, CD276+, CD133- , CD66acdeweak, IDO+, cFLIP+, MHC-I+, MHCIIweak pēc IFN-y terapijas, EpCAM+
Mutāciju profils
P53G266e, APCwt, K-RasG13D, mt13, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt
Vīrusi
Nesatur cilvēka patogēnos vīrusus SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Pēc atkausēšanas uzmanīgi resuspendējiet šūnu granulas. Centrifugēt ar 300 x g 3 minūtes un izlietot virskārtu. Sēklas ievietot 2x 25 cm² šūnu kultūru kolbās un atstāt kolbas 48 stundas inkubatorā. Ik pēc 2-3 dienām nomainiet izlietoto barotni, līdz tiek sasniegta 80-90 % konfluence. Tas aizņems aptuveni 10-14 dienas.
Sēšanas blīvums
5x104 šūnas/cm2 pēc atkausēšanas, 3x104 šūnas/cm2, kad šūnas strauji vairojas
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 līdz 5 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Fast
Atkausēšana un kultivēšana

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
69 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis