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HROC40
Tecido
Cólon descendente, UICC IIIa
Doença
Adenocarcinoma primário, estádio TNM T3N1M0R0L1V1, classificação G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

Documentos

HROC40

Cell line · Número do produto 300822

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
1

01Informações gerais

Descrição
Esta é uma linha celular de uma série de linhas celulares tumorais que foram estabelecidas pelo PD Dr. Michael Linnebacher a partir de espécimes de ressecção primária de CRC desde 2006.
Tecido
Cólon descendente, UICC IIIa
Doença
Adenocarcinoma primário, estádio TNM T3N1M0R0L1V1, classificação G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus imunossuprimidos
Estado de ploidia
Aneuploide
Estado do MSI
MSS

04Identificadores

Referência
HROC40 (número de catálogo Cytion 300822)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1G01

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Beta-actina, osteopontina baixa, recetor do tipo Toll (TLR) 3 moderado, TLR4 moderado, TLR7 baixo, TLR8 -, PTEN
Expressão do antígeno
CD326+, CD44+, CD15+, CD71+, CD73+, CD274+, CD47+, CD54+, CD95+, CD276+, CD133- , CD66acdeweak, IDO+, cFLIP+, MHC-I+, MHCIIweak após tratamento com IFN-y, EpCAM+
Perfil mutacional
P53G266e, APCwt, K-RasG13D, mt13, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt
Vírus
Isento de vírus patogénicos humanos SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Após o descongelamento, ressuspender cuidadosamente o sedimento celular. Centrifugar a 300 x g durante 3 min e deitar fora o sobrenadante. Semear em frascos de cultura de células de 2x 25 cm² e deixar os frascos durante 48 horas na incubadora. Substituir o meio gasto a cada 2-3 dias, até atingir 80-90% de confluência. Isto demorará cerca de 10-14 dias.
Densidade de sementeira
5x104 células/cm² após descongelamento, 3x104 células/cm² quando as células estiverem a proliferar vigorosamente
Renovação de fluidos
A cada 3 a 5 dias
Recuperação após o descongelamento
Rápido
Descongelamento e cultura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
69 anos
Etnia
Caucasiano