Gå direkte til indholdet
HROC40
Væv
Colon descendens, UICC IIIa
Sygdom
Primært adenokarcinom, TNM-stadie T3N1M0R0L1V1, gradering G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

Dokumenter

HROC40

Cell line · Varenummer 300822

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse
Dette er en cellelinje i en serie af tumorcellelinjer, som er blevet etableret af PD Dr. Michael Linnebacher fra primære CRC-resektionsprøver siden 2006.
Væv
Colon descendens, UICC IIIa
Sygdom
Primært adenokarcinom, TNM-stadie T3N1M0R0L1V1, gradering G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i immunsupprimerede nøgenmus
Ploidistatus
Aneuploid
MSI-status
MSS

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HROC40 (Cytion katalognummer 300822)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1G01

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Beta-actin, osteopontin lav, Toll-like receptor (TLR) 3 moderat, TLR4 moderat, TLR7 lav, TLR8 -, PTEN
Antigenudtryk
CD326+, CD44+, CD15+, CD71+, CD73+, CD274+, CD47+, CD54+, CD95+, CD276+, CD133-, CD66acdeweak, IDO+, cFLIP+, MHC-I+, MHCIIweak efter IFN-y-behandling, EpCAM+
Mutationsprofil
P53G266e, APCwt, K-RasG13D, mt13, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt
Vira
Fri for humanpatogene vira SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Efter optøning resuspenderes cellepelleten omhyggeligt. Centrifugér ved 300 x g i 3 minutter, og kassér supernatanten. Udså i 2x 25 cm² celledyrkningskolber, og lad kolberne stå i 48 timer i inkubatoren. Udskift det brugte medium hver 2-3 dag, indtil 80-90 % konfluency er nået. Det vil tage ca. 10-14 dage.
Såtæthed
5x104 celler/cm2 efter optøning, 3x104 celler/cm2, når cellerne formerer sig kraftigt
Væskeudskiftning
Hver 3. til 5. dag
Genopretning efter optøning
Hurtig
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
69 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk