Přejít na obsah
HROC40
Tkáň
Colon descendens, UICC IIIa
Nemoc
Primární adenokarcinom, TNM stadium T3N1M0R0L1V1, grading G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

Dokumenty

HROC40

Cell line · Číslo výrobku 300822

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis
Jedná se o jednu buněčnou linii ze série nádorových buněčných linií, které od roku 2006 vytvořil Dr. Michael Linnebacher z primárních resekátů CRC.
Tkáň
Colon descendens, UICC IIIa
Nemoc
Primární adenokarcinom, TNM stadium T3N1M0R0L1V1, grading G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u imunosuprimovaných nahých myší
Ploidní stav
Aneuploidní
Stav MSI
MSS

04Identifikátory

Citace
HROC40 (katalogové číslo Cytion 300822)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1G01

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Beta-aktin, osteopontin nízký, Toll-like receptor (TLR) 3 střední, TLR4 střední, TLR7 nízký, TLR8 -, PTEN
Exprese antigenu
CD326+, CD44+, CD15+, CD71+, CD73+, CD274+, CD47+, CD54+, CD95+, CD276+, CD133- , CD66acdeweak, IDO+, cFLIP+, MHC-I+, MHCIIweak po léčbě IFN-y, EpCAM+
Mutační profil
P53G266e, APCwt, K-RasG13D, mt13, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt
Viry
Neobsahuje lidské patogenní viry SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Po rozmrazení opatrně resuspendujte buněčnou peletu. Odstřeďujte při 300 x g po dobu 3 minut a supernatant zlikvidujte. Vysejte do baněk s buněčnou kulturou o velikosti 2x 25 cm² a nechte baňky 48 hodin v inkubátoru. Každé 2 až 3 dny vyměňte použité médium, dokud není dosaženo 80-90% konfluence. To bude trvat zhruba 10-14 dní.
Hustota výsevu
5x104 buněk/cm2 po rozmrazení, 3x104 buněk/cm2 po intenzivním množení buněk
Obnova tekutin
Každých 3 až 5 dní
Zotavení po rozmrazení
Rychle
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
69 let
Etnická příslušnost
Kavkazský