Siirry sisältöön
HROC40
Kudos
Colon descendens, UICC IIIa
Sairaus
Primaarinen adenokarsinooma, TNM-vaihe T3N1M0R0L1V1, luokitus G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

Asiakirjat

HROC40

Cell line · Tuotenumero 300822

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus
Tämä on yksi solulinja kasvainsolulinjojen sarjassa, jonka PD Dr. Michael Linnebacher on perustanut primaarisen CRC:n resektionäytteistä vuodesta 2006 lähtien.
Kudos
Colon descendens, UICC IIIa
Sairaus
Primaarinen adenokarsinooma, TNM-vaihe T3N1M0R0L1V1, luokitus G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, immuunipuutteisilla alastomilla hiirillä -
Ploidisuus
Aneuploidinen
MSI-tila
MSS

04Tunnisteet

Lähdeviite
HROC40 (Cytionin luettelonumero 300822)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1G01

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Beeta-aktiini, osteopontin alhainen, Tollin kaltainen reseptori (TLR) 3 kohtalainen, TLR4 kohtalainen, TLR7 alhainen, TLR8 -, PTEN
Antigeenin ilmentyminen
CD326+, CD44+, CD15+, CD71+, CD73+, CD274+, CD47+, CD54+, CD95+, CD276+, CD133- , CD66acdeweak, IDO+, cFLIP+, MHC-I+, MHCIIweak IFN-y-hoidon jälkeen, EpCAM+
Mutaatioprofiili
P53G266e, APCwt, K-RasG13D, mt13, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt
Virukset
Ei sisällä ihmisen patogeenisiä viruksia SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Sulattamisen jälkeen solupelletti suspendoidaan uudelleen varovasti. Sentrifugoidaan 300 x g:n voimakkuudella 3 minuutin ajan ja hävitetään supernatantti. Kylvetään 2x 25 cm²:n soluviljelypulloihin ja jätetään pulloihin 48 tunniksi inkubaattoriin. Vaihda käytetty väliaine 2-3 päivän välein, kunnes 80-90 % konfluenssista on saavutettu. Tämä kestää noin 10-14 päivää.
Kylvötiheys
5x104 solua/cm2 sulatuksen jälkeen, 3x104 solua/cm2 kun solut lisääntyvät voimakkaasti
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Nopea
Sulatus ja viljely

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
69 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen