Μετάβαση στο περιεχόμενο
HROC40
Ιστός
Colon descendens, UICC IIIa
Ασθένεια
Πρωτοπαθές αδενοκαρκίνωμα, στάδιο TNM T3N1M0R0L1V1, διαβάθμιση G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

Έγγραφα

HROC40

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300822

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Πρόκειται για μια κυτταρική σειρά από μια σειρά κυτταρικών σειρών όγκου που έχει δημιουργήσει ο PD Dr. Michael Linnebacher από δείγματα πρωτογενούς εκτομής CRC από το 2006.
Ιστός
Colon descendens, UICC IIIa
Ασθένεια
Πρωτοπαθές αδενοκαρκίνωμα, στάδιο TNM T3N1M0R0L1V1, διαβάθμιση G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Ογκογόνος
Ναι, σε ανοσοκατασταλμένα γυμνά ποντίκια
Πολυπλοειδής κατάσταση
Ανευπλοειδές
Κατάσταση MSI
MSS

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HROC40 (αριθμός καταλόγου Cytion 300822)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1G01

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
Β-ακτίνη, οστεοποντίνη χαμηλή, υποδοχέας τύπου Toll (TLR) 3 μέτριος, TLR4 μέτριος, TLR7 χαμηλός, TLR8 -, PTEN
Έκφραση αντιγόνου
CD326+, CD44+, CD15+, CD71+, CD73+, CD274+, CD47+, CD54+, CD95+, CD276+, CD133- , CD66acdeweak, IDO+, cFLIP+, MHC-I+, MHCIIweak μετά από θεραπεία με IFN-y, EpCAM+
Προφίλ μεταλλάξεων
P53G266e, APCwt, K-RasG13D, mt13, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt
Ιοί
Χωρίς ανθρώπινους παθογόνους ιούς SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Μετά την απόψυξη, ανασυσσωματώστε προσεκτικά το κυτταρικό σφαιρίδιο. Φυγοκεντρήστε στα 300 x g για 3 λεπτά και απορρίψτε το υπερκείμενο. Σπείρετε σε φιάλες κυτταροκαλλιέργειας 2x 25 cm² και αφήστε τις φιάλες για 48 ώρες στον επωαστήρα. Αντικαταστήστε το χρησιμοποιημένο μέσο κάθε 2-3 ημέρες, έως ότου επιτευχθεί πληρότητα 80-90%. Αυτό θα διαρκέσει περίπου 10-14 ημέρες.
Πυκνότητα σποράς
5x104 κύτταρα/cm2 μετά την απόψυξη, 3x104 κύτταρα/cm2 μόλις τα κύτταρα αρχίσουν να πολλαπλασιάζονται έντονα
Ανανέωση υγρών
Κάθε 3 έως 5 ημέρες
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Γρήγορη
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
69 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος