Preskoči na vsebino
HROC40
Tkivo
Colon descendens, UICC IIIa
Bolezen
Primarni adenokarcinom, stadij TNM T3N1M0R0L1V1, grading G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

Dokumenti

HROC40

Cell line · Številka izdelka 300822

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis
To je ena od celičnih linij iz serije tumorskih celičnih linij, ki jih je doktor Michael Linnebacher od leta 2006 vzpostavil iz vzorcev primarnih resekcij CRC.
Tkivo
Colon descendens, UICC IIIa
Bolezen
Primarni adenokarcinom, stadij TNM T3N1M0R0L1V1, grading G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, pri imunsko oslabljenih golih miših
Ploidnost
Aneuploidni
Stanje MSI
MSS

04Identifikatorji

Navajanje vira
HROC40 (kataloška številka Cytion 300822)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1G01

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Beta-aktin, osteopontin nizko, Tollu podoben receptor (TLR) 3 zmerno, TLR4 zmerno, TLR7 nizko, TLR8 -, PTEN
Ekspresija antigena
CD326+, CD44+, CD15+, CD71+, CD73+, CD274+, CD47+, CD54+, CD95+, CD276+, CD133- , CD66acdeweak, IDO+, cFLIP+, MHC-I+, MHCIIweak po zdravljenju z IFN-y, EpCAM+
Profil mutacij
P53G266e, APCwt, K-RasG13D, mt13, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt
Virusi
Brez človeških patogenih virusov SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Po odmrznitvi previdno ponovno suspendirajte celično peleto. Centrifugirajte pri 300 x g 3 min in zavrzite supernatant. Razporedite v bučke za gojenje celic s površino 2x 25 cm² in jih pustite 48 ur v inkubatorju. Porabljeno gojišče zamenjajte vsake 2 do 3 dni, dokler ne dosežete 80-90-odstotne zlitosti. To bo trajalo približno 10-14 dni.
Gostota setve
5x104 celic/cm2 po odmrzovanju, 3x104 celic/cm2, ko se celice močno razmnožujejo
Obnova tekočine
Vsakih 3 do 5 dni
Obnova po odtaljevanju
Hitro
Odtaljevanje in gojenje

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
69 let
Etnična pripadnost
Kavkaški