Langsung ke isi
HROC40
Tisu
Usus besar turun, UICC IIIa
Penyakit
Adenokarsinoma primer, stadium TNM T3N1M0R0L1V1, grading G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

Dokumen

HROC40

Cell line · Nomor produk 300822

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
1

01Informasi umum

Deskripsi
Ini adalah salah satu garis sel dari serangkaian garis sel tumor yang telah dibuat oleh PD Dr. Michael Linnebacher dari spesimen reseksi CRC primer sejak tahun 2006.
Tisu
Usus besar turun, UICC IIIa
Penyakit
Adenokarsinoma primer, stadium TNM T3N1M0R0L1V1, grading G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang yang mengalami penekanan kekebalan tubuh
Status ploidi
Aneuploid
Status MSI
MSS

04Pengidentifikasi

Referensi
HROC40 (Nomor katalog Cytion 300822)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1G01

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi protein
Beta-aktin, osteopontin rendah, Toll-like receptor (TLR) 3 sedang, TLR4 sedang, TLR7 rendah, TLR8 -, PTEN
Ekspresi antigen
CD326+, CD44+, CD15+, CD71+, CD73+, CD274+, CD47+, CD54+, CD95+, CD276+, CD133-, CD66acdeweak, IDO+, cFLIP+, MHC-I+, MHCIIlemah setelah pengobatan IFN-y, EpCAM+
Profil mutasi
P53G266e, APCwt, K-RasG13D, mt13, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt
Virus
Bebas dari virus patogen manusia SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Setelah dicairkan, resuspensi pelet sel dengan hati-hati. Sentrifus pada 300 x g selama 3 menit dan buang supernatan. Masukkan ke dalam labu kultur sel berukuran 2x 25 cm² dan biarkan labu tersebut selama 48 jam dalam inkubator. Ganti media yang digunakan setiap 2-3 hari, sampai 80-90% konfluensi tercapai. Ini akan memakan waktu sekitar 10-14 hari.
Kepadatan penanaman
5x10⁴ sel/cm² setelah pencairan, 3x10⁴ sel/cm² setelah sel-sel mulai berkembang biak dengan cepat.
Pergantian cairan
Setiap 3 hingga 5 hari
Pemulihan pasca-pencairan
Cepat
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
69 tahun
Etnis
Kaukasia