.jpg)
- Vev
- Colon descendens, UICC IIIa
- Sykdom
- Primært adenokarsinom, TNM-stadium T3N1M0R0L1V1, gradering G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18
Dokumenter
HROC40
Cell line · Produktnummer 300822
This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 2006.
Tilpasning / Anbefalinger
- HROC40Cell line€800.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
- Dette er én cellelinje i en serie av tumorcellelinjer som PD Dr. Michael Linnebacher har etablert fra primære CRC-reseksjonspreparater siden 2006.
- Vev
- Colon descendens, UICC IIIa
- Sykdom
- Primært adenokarsinom, TNM-stadium T3N1M0R0L1V1, gradering G3, Lk(n) + 2, Σ Lk(n) 18
02Klassifisering
- Organisme
- Menneske
- Sex
- Mann
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Tumorinduserende
- Ja, i immunsupprimerte nakne mus
- Ploidistatus
- Aneuploid
- MSI-status
- MSS
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- HROC40 (Cytion-katalognummer 300822)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1G01
05Uttrykk og mottakelighet
- Proteinekspresjon
- Beta-aktin, osteopontin lav, Toll-lignende reseptor (TLR) 3 moderat, TLR4 moderat, TLR7 lav, TLR8 -, PTEN
- Antigenuttrykk
- CD326+, CD44+, CD15+, CD71+, CD73+, CD274+, CD47+, CD54+, CD95+, CD276+, CD133- , CD66acdeweak, IDO+, cFLIP+, MHC-I+, MHCIIweak etter IFN-y-behandling, EpCAM+
- Mutasjonsprofil
- P53G266e, APCwt, K-RasG13D, mt13, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt
- Virus
- Fri for humanpatogene virus SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Etter tining resuspenderer du cellepelleten forsiktig. Sentrifuger ved 300 x g i 3 minutter, og kast supernatanten. Så ut i 2 x 25 cm² cellekulturkolber, og la kolbene stå i inkubatoren i 48 timer. Bytt ut det brukte mediet hver 2.-3. dag til 80-90 % konfluens er nådd. Dette vil ta omtrent 10-14 dager.
- Såtetthet
- 5x104 celler/cm2 etter tining, 3x104 celler/cm2 når cellene formerer seg kraftig
- Væskefornyelse
- Hver 3. til 5. dag
- Gjenoppretting etter tining
- Rask
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Donorens alder
- 69 år
- Etnisitet
- Kaukasisk
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtaler med tredjeparter gjelder
- Ja