- Tissue
- Músculo
- Disease
- Rabdomiosarcoma
- Metastatic site
- Localización del tumor primario (músculo)
- Synonyms
- A-204
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Células A204
Cell line · Product number 300109
A204 cells are human epithelial cells derived from the muscles of a 1-year-old female patient with rhabdomyosarcoma. With applications in 3D cell culture ...
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01General information
- Description
Las células A204 son células epiteliales humanas derivadas de los músculos de una paciente de un año de edad con rabdomiosarcoma. Con aplicaciones en el cultivo celular en 3D y propiedades tumorigénicas, las células A-204 ofrecen la oportunidad de estudiar la biología tumoral y posibles intervenciones terapéuticas. Al derivarse del tejido muscular, las células A-204 se asemejan mucho a la capa externa de células que se encuentra en órganos y tejidos.
La línea celular A204 se caracteriza por su fenotipo agresivo e indiferenciado, lo que la convierte en un modelo valioso para investigar los mecanismos moleculares de la tumorigénesis y la metástasis en los sarcomas de tejidos blandos.
La presencia de isoenzimas específicas, entre ellas AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 y PGM3, en las células A-204 brinda información sobre sus características metabólicas. Estas isoenzimas pueden desempeñar un papel en la comprensión de los procesos celulares involucrados en la progresión del cáncer y la respuesta al tratamiento.
Estas células presentan un crecimiento robusto in vitro y se han utilizado para estudiar la proliferación celular, la apoptosis y los mecanismos de resistencia a los fármacos. La línea celular A204 también es fundamental para la evaluación de nuevos agentes quimioterapéuticos y para comprender la interacción entre las células del rabdomiosarcoma y los compuestos terapéuticos.
Esta línea celular constituye una herramienta esencial para los investigadores del cáncer que buscan desarrollar tratamientos más eficaces contra los sarcomas y otras neoplasias malignas relacionadas.
- Tissue
- Músculo
- Disease
- Rabdomiosarcoma
- Metastatic site
- Localización del tumor primario (músculo)
- Applications
- Investigación sobre el rabdomiosarcoma; biología del sarcoma pediátrico; estudios sobre la diferenciación muscular; sensibilidad a los fármacos; modelos preclínicos de sarcoma
- Synonyms
- A-204
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype rhabdomyosarcoma cell line
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Cell type
- Células de rabdomiosarcoma
- Tumourigenic
- En ratones nude. Forma pequeños tumores malignos que se asemejan al rabdomiosarcoma embrionario.
- Ploidy status
- Diploides y tetraploides
- MSI status
- Estable (MSS)
- Doubling time
- De 26 a 36 horas
04Identifiers
- Citation
- A204 (número de catálogo de Cytion 300109)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1058
05Expression and susceptibility
- Isoenzymes
- PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Split ratio
- Del 1 al 5
- Seeding density
- De 0,5 a 1 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 2 × 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 a 48 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 1 año
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes