Mine otse sisu juurde
A204 Rakud
Kude
Lihas
Haigus
Rabdomüosarkoom
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (lihas)
Sünonüümid
A-204

Dokumendid

A204 Rakud

Cell line · Toote number 300109

A204-rakud on inimese epiteelrakud, mis on saadud 1-aastase naispatsiendi, kellel oli rabdomüosarkoom, lihastest. Neid kasutatakse 3D-rakukultuuris ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

A204 rakud on inimese epiteelirakud, mis on saadud 1-aastase rabdomüosarkoomiga naissoost patsiendi lihastest. A-204 rakud, millel on rakendused 3D rakukultuuris ja tumorigeensed omadused, annavad võimaluse uurida kasvaja bioloogiat ja võimalikke terapeutilisi sekkumisi. Lihaskoest saadud A-204 rakud sarnanevad väga täpselt organites ja kudedes leiduvate rakkude väliskihiga.

A204 rakuliini iseloomustab agressiivne diferentseerimata fenotüüp, mis muudab selle väärtuslikuks mudeliks pehmete kudede sarkoomide kasvajate tekke ja metastaaside molekulaarsete mehhanismide uurimiseks.

Spetsiifiliste isoensüümide, sealhulgas AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 ja PGM3 olemasolu A-204 rakkudes annab ülevaate nende metaboolsetest omadustest. Need isoensüümid võivad mängida rolli vähi progresseerumise ja ravivastusega seotud rakuprotsesside mõistmisel.

Need rakud näitavad tugevat kasvu in vitro ja neid on kasutatud rakkude proliferatsiooni, apoptoosi ja ravimresistentsuse mehhanismide uurimiseks. A204 rakuliin on oluline ka uute kemoterapeutiliste ainete hindamisel ja rabdomüosarkoomi rakkude ja ravimiühendite vahelise koostoime mõistmisel.

See rakuliin on oluline vahend vähiuurijatele, kes püüavad välja töötada tõhusamaid ravimeetodeid sarkoomide ja muude seotud pahaloomuliste haiguste raviks.

Kude
Lihas
Haigus
Rabdomüosarkoom
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (lihas)
Rakendused
Rabdomüosarkoomi uurimine; laste sarkoomi bioloogia; lihaste diferentseerumise uuringud; ravimite suhtes tundlikkus; sarkoomi prekliinilised mudelid
Sünonüümid
  • A-204

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; wildtype rhabdomyosarcoma cell line
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Rabdomüosarkoomi rakud
Tuumorigeenne
Alasti hiirtel. Moodustab väikeseid pahaloomulisi kasvajaid, mis vastavad embrüonaalsele rabdomüosarkoomile.
Ploidsus
Diploidne ja tetraploidne
MSI staatus
Stabiilne (MSS)
Kahekordistumisaeg
26-36 tundi

04Tunnused

Viide
A204 (Cytioni katalooginumber 300109)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1058

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Isoensüümid
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
0,5 kuni 1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 2 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24–48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
1 aasta