Siirry sisältöön
A204 Solut
Kudos
Lihas
Sairaus
Rabdomyosarkooma
Metastaasikohde
Ensisijainen kasvaimen sijainti (lihas)
Synonyymit
A-204

Asiakirjat

A204 Solut

Cell line · Tuotenumero 300109

A204-solut ovat ihmisen epiteelisoluja, jotka on eristetty 1-vuotiaan naispotilaan rabdomyosarkoomaa sairastavan potilaan lihaksista. Niitä käytetään 3D-soluviljelyssä ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

A204-solut ovat ihmisen epiteelisoluja, jotka on saatu rabdomyosarkoomaa sairastavan 1-vuotiaan naispotilaan lihaksista. A-204-solut, joilla on sovelluksia 3D-soluviljelyssä ja kasvainvaikutusominaisuuksia, tarjoavat mahdollisuuden tutkia kasvainten biologiaa ja mahdollisia terapeuttisia interventioita. Lihaskudoksesta peräisin olevat A-204-solut muistuttavat läheisesti elimissä ja kudoksissa esiintyvää ulointa solukerrosta.

A204-solulinjalle on ominaista aggressiivinen, erilaistumaton fenotyyppi, mikä tekee siitä arvokkaan mallin pehmytkudossarkoomien kasvainten synnyn ja etäpesäkkeiden molekyylimekanismien tutkimiseen.

Spesifisten isoentsyymien, kuten AK-1:n, ES-D:n, G6PD:n, GLO-I:n, Me-2:n, PGM1:n ja PGM3:n, esiintyminen A-204-soluissa antaa tietoa niiden metabolisista ominaisuuksista. Näillä isoentsyymeillä voi olla merkitystä syövän etenemiseen ja hoitovasteeseen liittyvien soluprosessien ymmärtämisessä.

Nämä solut kasvavat voimakkaasti in vitro, ja niitä on käytetty solujen lisääntymisen, apoptoosin ja lääkeresistenssimekanismien tutkimiseen. A204-solulinja on myös tärkeä uusien kemoterapeuttisten aineiden arvioinnissa ja rabdomyosarkoomasolujen ja terapeuttisten yhdisteiden välisen vuorovaikutuksen ymmärtämisessä.

Tämä solulinja on tärkeä väline syöpätutkijoille, jotka pyrkivät kehittämään tehokkaampia hoitoja sarkoomiin ja muihin niihin liittyviin pahanlaatuisiin sairauksiin.

Kudos
Lihas
Sairaus
Rabdomyosarkooma
Metastaasikohde
Ensisijainen kasvaimen sijainti (lihas)
Sovellukset
Rabdomyosarkooman tutkimus; lasten sarkoomien biologia; lihasten erilaistumista koskevat tutkimukset; lääkeherkkyys; prekliiniset sarkoomamallit
Synonyymit
  • A-204

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification; wildtype rhabdomyosarcoma cell line
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Rabdomyosarkoomasolut
Kasvaimia aiheuttava
Alastomilla hiirillä. Muodostaa pieniä pahanlaatuisia kasvaimia, jotka vastaavat alkion rabdomyosarkoomaa.
Ploidisuus
Diploidiset ja tetraploidiset
MSI-tila
Vakaa (MSS)
Kaksinkertaistumisaika
26-36 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
A204 (Cytionin luettelonumero 300109)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1058

05Ilmentyminen ja alttius

Isoentsyymit
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
0,5–1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 2 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24–48 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
1 vuosi