Přejít na obsah
A204 Buňky
Tkáň
Svaly
Nemoc
Rabdomyosarkom
Místo metastázy
Místo primárního nádoru (sval)
Synonyma
A-204

Dokumenty

A204 Buňky

Cell line · Číslo výrobku 300109

Buňky A204 jsou lidské epiteliální buňky získané ze svalů jednoroční pacientky s rabdomyosarkomem. S využitím v 3D buněčné kultuře ...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky A204 jsou lidské epiteliální buňky získané ze svalů roční pacientky s rabdomyosarkomem. Díky použití v 3D buněčných kulturách a nádorovým vlastnostem poskytují buňky A-204 příležitost ke studiu biologie nádorů a potenciálních terapeutických zásahů. Buňky A-204, odvozené ze svalové tkáně, se velmi podobají vnější vrstvě buněk, které se nacházejí v orgánech a tkáních.

Buněčná linie A204 se vyznačuje agresivním nediferencovaným fenotypem, což z ní činí cenný model pro zkoumání molekulárních mechanismů nádorového bujení a metastazování u sarkomů měkkých tkání.

Přítomnost specifických izoenzymů, včetně AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 a PGM3, v buňkách A-204 umožňuje nahlédnout do jejich metabolických vlastností. Tyto izoenzymy mohou hrát roli v pochopení buněčných procesů, které se podílejí na progresi rakoviny a odpovědi na léčbu.

Tyto buňky vykazují robustní růst in vitro a byly použity ke studiu buněčné proliferace, apoptózy a mechanismů rezistence vůči lékům. Buněčná linie A204 je také důležitá pro hodnocení nových chemoterapeutických látek a pro pochopení interakce mezi buňkami rhabdomyosarkomu a terapeutickými sloučeninami.

Tato buněčná linie slouží jako nezbytný nástroj pro výzkumné pracovníky zabývající se rakovinou, jejichž cílem je vyvinout účinnější léčbu sarkomů a dalších příbuzných malignit.

Tkáň
Svaly
Nemoc
Rabdomyosarkom
Místo metastázy
Místo primárního nádoru (sval)
Aplikace
Výzkum rabdomyosarkomu; biologie dětských sarkomů; studie diferenciace svalové tkáně; citlivost na léčiva; předklinické modely sarkomů
Synonyma
  • A-204

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o statusu GMO
No genetic modification; wildtype rhabdomyosarcoma cell line
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Buňky rabdomyosarkomu
Tumorogenní
U nahých myší. Tvoří malé maligní nádory, které jsou podobné embryonálnímu rabdomyosarkomu.
Ploidní stav
Diploidní a tetraploidní
Stav MSI
Stabilní (MSS)
Doba zdvojnásobení
26 až 36 hodin

04Identifikátory

Citace
A204 (katalogové číslo Cytion 300109)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1058

05Exprese a náchylnost

Isoenzymy
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
0,5 až 1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 2 x 104 buněk/cm2 a nechte je zotavit se z procesu zmrazení a přilnout po dobu nejméně 24 až 48 hodin.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
1 rok