Pāriet uz saturu
A204 Šūnas
Audums
Muskuļi
Slimība
Rabdomiosarkoma
Metastāžu vieta
Primārā audzēja lokalizācija (muskuļi)
Sinonīmi
A-204

Dokumenti

A204 Šūnas

Cell line · Preces numurs 300109

A204 šūnas ir cilvēka epitēlija šūnas, kas iegūtas no 1 gadu vecas sievietes pacientes, kurai diagnosticēta rabdomiosarkoma, muskuļiem. Tās tiek izmantotas 3D šūnu kultūrās ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

A204 šūnas ir cilvēka epitēlija šūnas, kas iegūtas no 1 gadu vecas sievietes, kura bija saslimusi ar rabdomiosarkomu, muskuļiem. A-204 šūnas, ko var izmantot 3D šūnu kultūrā un kurām piemīt audzēja īpašības, sniedz iespēju pētīt audzēju bioloģiju un iespējamās terapeitiskās iejaukšanās iespējas. A-204 šūnas, kas iegūtas no muskuļu audiem, ir ļoti līdzīgas orgānu un audu šūnu ārējam slānim.

A204 šūnu līnijai ir raksturīgs agresīvs nediferencēts fenotips, tāpēc tā ir vērtīgs modelis mīksto audu sarkomu audzēju rašanās un metastāžu molekulāro mehānismu izpētei.

Konkrētu izoenzīmu, tostarp AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 un PGM3, klātbūtne A-204 šūnās sniedz ieskatu to metaboliskajās īpašībās. Šiem izoenzīmiem var būt nozīme, lai izprastu vēža progresēšanu un atbildes reakciju uz ārstēšanu veicinošos šūnu procesus.

Šīm šūnām piemīt spēcīga augšana in vitro, un tās ir izmantotas šūnu proliferācijas, apoptozes un rezistences pret zālēm mehānismu izpētei. A204 šūnu līnija ir noderīga arī jaunu ķīmijterapeitisko līdzekļu novērtēšanā un rabdomiosarkomu šūnu un terapeitisko savienojumu mijiedarbības izpratnē.

Šī šūnu līnija kalpo kā būtisks rīks vēža pētniekiem, kuru mērķis ir izstrādāt efektīvāku ārstēšanu sarkomu un citu radniecīgu ļaundabīgu audzēju gadījumā.

Audums
Muskuļi
Slimība
Rabdomiosarkoma
Metastāžu vieta
Primārā audzēja lokalizācija (muskuļi)
Pieteikumi
Rabdomiosarkomas pētījumi; bērnu sarkomu bioloģija; muskuļu diferenciācijas pētījumi; jutība pret zālēm; sarkomu pirmsklīniskie modeļi
Sinonīmi
  • A-204

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
Bez ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
No genetic modification; wildtype rhabdomyosarcoma cell line
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Rabdomiosarkomas šūnas
Tumorogēns
Plikām pelēm. Veido nelielus ļaundabīgus audzējus, kas atbilst embrionālajai rabdomiosarkomai.
Ploidijas statuss
Diploīdi un tetraploīdi
MSI statuss
Stabils (MSS)
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
26 līdz 36 stundas

04Identifikatori

Atsauce
A204 (Cytion kataloga numurs 300109)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1058

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
0,5 līdz 1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas 2 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 līdz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
1 gads