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Cellules SCLC-21H
Tissue
Poumon
Disease
Carcinome
Metastatic site
Épanchement pleural
Synonyms
SCLC21H

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Cellules SCLC-21H

Cell line · Product number 300225

The SCLC-21H cell line was derived from the pleural effusion of a patient with small cell lung cancer (SCLC) of the oat cell subtype. This cell line, alon...

US$395.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire SCLC-21H a été isolée à partir de l’épanchement pleural d’un patient atteint d’un cancer du poumon à petites cellules (SCLC) du sous-type « cellules en grains d’avoine ». Cette lignée cellulaire, tout comme la lignée SCLC-22H, a été établie au cours d’une période de chimiothérapie, la lignée SCLC-21H ayant été la deuxième à être isolée après 15 jours supplémentaires de traitement. Bien que les deux lignées cellulaires proviennent du même patient, elles présentent des propriétés biochimiques, morphologiques et cinétiques sensiblement différentes. La lignée SCLC-21H, par exemple, présente un temps de doublement de la population plus rapide et une efficacité de formation de colonies plus élevée que la lignée SCLC-22H. Ces différences font de la lignée SCLC-21H un outil distinct pour l’étude de certaines formes variantes du SCLC.

Sur le plan biochimique, la lignée SCLC-21H se distingue de la lignée SCLC-22H par ses niveaux faibles, voire indétectables, de marqueurs neuroendocriniens clés tels que la L-Dopa décarboxylase, la bombésine et l’antigène carcino-embryonnaire. Cependant, les deux lignées cellulaires expriment des niveaux élevés d’énolase spécifique aux neurones et de l’isoenzyme BB de la créatine kinase, qui sont des marqueurs caractéristiques du SCLC. De plus, bien que les deux lignées cellulaires présentent une amplification du gène c-myc, la lignée SCLC-21H contient un fragment EcoRI du gène c-myc supplémentaire, réarrangé et amplifié, ce qui souligne encore davantage son caractère génétique unique.

Sur le plan structurel, la lignée SCLC-21H présente une croissance lâche en culture et se caractérise par des nucléoles proéminents et un cytoplasme abondant, ce qui contraste avec la morphologie plus compacte de la lignée SCLC-22H. La présence de granules denses au niveau ultrastructural dans la lignée SCLC-21H confirme son origine neuroendocrine, et celle-ci est classée comme représentant une forme variante du CPPC. Ces caractéristiques distinctives font de la lignée SCLC-21H un modèle précieux pour l’étude des formes variantes du cancer du poumon à petites cellules et pour la compréhension de leur réponse à la chimiothérapie.

Tissue
Poumon
Disease
Carcinome
Metastatic site
Épanchement pleural
Synonyms
  • SCLC21H

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
Oui, chez les souris « nude »
Ploidy status
Aneuploïde
Karyotype
Nombre modal de chromosomes : 42/43, intervalle : 39-44. Délétion chromosomique 3p.
Doubling time
45 heures

04Identifiers

Citation
SCLC-21H (numéro de catalogue Cytion 300225)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0024

05Expression and susceptibility

Oncogenes
Amplification de Myc détectée, expression élevée de c-myc

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de sérum fœtal bovin (FBS) inactivé par la chaleur
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Une ou deux fois par semaine, ajoutez 5 ml de milieu de culture cellulaire frais dès que le milieu de culture devient acide. Effectuez une reculture dès que vous observez de nombreux amas très volumineux. Dissociez les amas en recueillant les cellules, en les rinçant une fois avec du PBS sans calcium ni magnésium, puis en ajoutant 3 à 5 ml d’Accutase. Incubez pendant 10 minutes à 37 degrés Celsius. Récupérez les cellules après centrifugation, remettez-les en suspension dans du milieu de culture cellulaire frais et comptez-les.
Seeding density
de 2 à 4 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery
Les cellules se remettront de la congélation en 24 à 48 heures.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un mélange composé de 50 % de milieu de base + 40 % de FBS + 10 % de DMSO, ou du CM-1 (numéro de catalogue Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés afin d’améliorer la récupération et de réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
46 ans
Ethnicity
caucasien