SCLC-21H-celler

SCLC-21H-cellelinjen ble avledet fra pleuraeffusjon fra en pasient med småcellet lungekreft (SCLC) av havrecellesubtypen. Denne cellelinjen ble, sammen med SCLC-22H, etablert i løpet av en periode med cellegiftbehandling, og SCLC-21H var den andre cellelinjen som ble avledet etter ytterligere 15 dager med behandling. Selv om begge cellelinjene stammer fra samme pasient, har de vesentlig forskjellige biokjemiske, morfologiske og kinetiske egenskaper. SCLC-21H har for eksempel en raskere populasjonsfordoblingstid og en høyere kolonidannende effektivitet sammenlignet med SCLC-22H. Disse forskjellene gjør SCLC-21H til et unikt verktøy for å studere visse varianter av SCLC.

Biokjemisk skiller SCLC-21H seg fra SCLC-22H ved at den har lave eller ikke påvisbare nivåer av viktige nevroendokrine markører som L-Dopa dekarboksylase, bombesin og karsinoembryonalt antigen. Begge cellelinjene uttrykker imidlertid høye nivåer av nevronspesifikk enolase og kreatinkinase-isoenzym BB, som er karakteristiske markører for SCLC. Begge cellelinjene viser dessuten c-myc-amplifikasjon, men SCLC-21H inneholder i tillegg et rearrangert og amplifisert EcoRI c-myc-fragment, noe som ytterligere understreker dens genetiske egenart.

Strukturelt sett vokser SCLC-21H løst i kultur og har fremtredende nukleoler og rikelig cytoplasma, noe som står i kontrast til den mer tettpakkede morfologien til SCLC-22H. Tilstedeværelsen av ultrastrukturelt tette kjernekorn i SCLC-21H bekrefter dens nevroendokrine opprinnelse, og den er klassifisert som en variantform av SCLC. Disse særtrekkene gjør SCLC-21H til en verdifull modell for å utforske variantformer av småcellet lungekreft og forstå hvordan de responderer på kjemoterapi.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring