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SCLC-21H細胞
ティッシュ
肺
病気
癌腫
転移部位
胸水
同義語
SCLC21H

SCLC-21H細胞

Cell line · 製品番号 300225

SCLC-21H細胞株は、オートセル型小細胞肺がん(SCLC)患者の胸水から樹立されたものである。この細胞株は、さらに...

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01概要

説明

SCLC-21H細胞株は、麦粒腫細胞亜型の小細胞肺癌(SCLC)患者の胸水から得られた。この細胞株はSCLC-22Hとともに化学療法期間中に樹立され、SCLC-21Hはさらに15日間の治療後に樹立された2番目の細胞株である。両細胞株は同じ患者に由来しているが、生化学的、形態学的、動力学的特性は著しく異なっている。例えば、SCLC-21HはSCLC-22Hと比較して、集団倍加時間が速く、コロニー形成効率が高い。これらの違いから、SCLC-21HはSCLCのある種の変異型を研究するための明確なツールとなっている。

生化学的には、SCLC-21HはL-ドパ脱炭酸酵素、ボンベシン、カルサイノ胚性抗原のような主要な神経内分泌マーカーのレベルが低いか検出されない点でSCLC-22Hと異なる。しかし、両細胞株ともSCLCの特徴的なマーカーであるニューロン特異的エノラーゼとクレアチンキナーゼアイソザイムBBを高レベルで発現している。さらに、両細胞株ともc-myc増幅を示すが、SCLC-21Hはさらに再配列され増幅されたEcoRI c-myc断片を含んでおり、その遺伝的独自性をさらに強調している。

構造的には、SCLC-21Hは培養で緩やかな増殖を示し、顕著な核小体と豊富な細胞質を特徴とし、SCLC-22Hのより緊密に詰まった形態とは対照的である。SCLC-21Hには超微細構造的に高密度のコア顆粒が存在することから、神経内分泌由来であることが確認され、SCLCの変異型に分類される。これらの明確な特徴により、SCLC-21Hは小細胞肺癌の変異型を探索し、化学療法に対する反応を理解するための貴重なモデルとなる。

ティッシュ
肺
病気
癌腫
転移部位
胸水
同義語
  • SCLC21H

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
サスペンション
バイオセーフティレベル
1

03特徴

腫瘍形成性
ヌードマウス
倍数性
異数体
核型
モーダル染色体数42/43、範囲39-44。染色体欠失3p。
倍増時間
45時間

04識別子

引用
SCLC-21H (Cytion カタログ番号 300225)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0024

05発現と感受性

発がん遺伝子
Myc増幅あり、c-myc発現高値

06取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10%熱不活性化FBSを加える。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
週に1~2回、培地が酸性になり次第、新鮮な細胞培養液を5ml加える。非常に大きなクラスターが多数観察されたらすぐに培養する。細胞を回収し、カルシウム/マグネシウムを含まないPBSで一度洗浄し、3~5mlのアキュターゼを加えてクラスターを解離させる。37℃で10分間インキュベートする。遠心後細胞を回収し、新鮮な細胞培養培地に再懸濁し、カウントする。
播種密度
2~4 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
細胞は24~48時間以内に凍結から回復する。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、50%基礎培地+40%FBS+10%DMSO、またはCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用する。この培地には、回復を促進し、凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤が含まれている。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
46年
民族
白人