Células SCLC-21H

A linhagem celular SCLC-21H foi derivada do derrame pleural de um paciente com câncer de pulmão de pequenas células (SCLC) do subtipo de células em forma de aveia. Essa linhagem celular, juntamente com a SCLC-22H, foi estabelecida durante um período de quimioterapia, sendo a SCLC-21H a segunda a ser derivada, após mais 15 dias de tratamento. Embora ambas as linhagens celulares tenham se originado do mesmo paciente, elas apresentam propriedades bioquímicas, morfológicas e cinéticas significativamente diferentes. A SCLC-21H, por exemplo, apresenta um tempo de duplicação populacional mais rápido e uma maior eficiência na formação de colônias em comparação com a SCLC-22H. Essas diferenças tornam a SCLC-21H uma ferramenta distinta para o estudo de certas variantes do SCLC.

Bioquimicamente, a SCLC-21H difere da SCLC-22H por apresentar níveis baixos ou indetectáveis de marcadores neuroendócrinos-chave, como a L-Dopa descarboxilase, a bombesina e o antígeno carcinoembrionário. No entanto, ambas as linhagens celulares expressam altos níveis de enolase específica de neurônios e da isoenzima BB da creatina quinase, que são marcadores característicos do SCLC. Além disso, embora ambas as linhagens celulares apresentem amplificação do c-myc, a SCLC-21H contém um fragmento adicional de c-myc rearranjado e amplificado pelo EcoRI, o que destaca ainda mais sua singularidade genética.

Estruturalmente, a SCLC-21H apresenta crescimento disperso em cultura e caracteriza-se por nucléolos proeminentes e citoplasma abundante, contrastando com a morfologia mais compacta da SCLC-22H. A presença de grânulos de núcleo densos na ultraestrutura da SCLC-21H confirma sua origem neuroendócrina, e ela é classificada como uma forma variante do SCLC. Essas características distintas tornam a SCLC-21H um modelo valioso para explorar as formas variantes do câncer de pulmão de pequenas células e compreender sua resposta à quimioterapia.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.