Премини към съдържанието
Клетки SCLC-21H
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Карцином
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
SCLC21H

Документи

Клетки SCLC-21H

Cell line · Номер на продукта 300225

Клетъчната линия SCLC-21H е получена от плеврален излив на пациент с дребноклетъчен белодробен карцином (SCLC) от подтипа „овесени клетки“. Тази клетъчна линия, сама по себе си...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия SCLC-21H е получена от плевралния излив на пациент с дребноклетъчен рак на белия дроб (SCLC) от овесеноклетъчен подтип. Тази клетъчна линия, заедно с SCLC-22H, е създадена по време на период на химиотерапия, като SCLC-21H е втората, получена след допълнително 15-дневно лечение. Въпреки че и двете клетъчни линии произхождат от един и същи пациент, те показват значително различни биохимични, морфологични и кинетични свойства. SCLC-21H например има по-бързо време за удвояване на популацията и по-висока ефективност на образуване на колонии в сравнение с SCLC-22H. Тези разлики правят SCLC-21H отличен инструмент за изучаване на някои вариантни форми на SCLC.

От биохимична гледна точка SCLC-21H се различава от SCLC-22H по ниските или неоткриваеми нива на ключови невроендокринни маркери като L-Dopa декарбоксилаза, бомбезин и карциноембрионален антиген. Въпреки това и двете клетъчни линии експресират високи нива на неврон-специфична енолаза и креатин киназа изоензим ВВ, които са характерни маркери за SCLC. Освен това, въпреки че и двете клетъчни линии показват амплификация на c-myc, SCLC-21H съдържа допълнителен пренареден и амплифициран EcoRI фрагмент на c-myc, което допълнително подчертава генетичната му уникалност.

В структурно отношение SCLC-21H показва свободен растеж в културата и се отличава с изпъкнали ядра и обилна цитоплазма, което контрастира с по-плътно опакованата морфология на SCLC-22H. Наличието на ултраструктурно плътни ядрени гранули в SCLC-21H потвърждава неговия невроендокринен произход и той се класифицира като представляващ вариантна форма на SCLC. Тези отличителни характеристики превръщат SCLC-21H в ценен модел за изследване на вариантните форми на дребноклетъчния рак на белия дроб и за разбиране на техния отговор към химиотерапия.

Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Карцином
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
  • SCLC21H

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Туморогенен
Да при голи мишки
Плоидност
Анеуплоидни
Кариотип
Модален хромозомен номер 42/43, диапазон 39-44. Делеция на хромозома 3р.
Време за удвояване
45 часа

04Идентификатори

Източник
SCLC-21H (каталожен номер 300225 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0024

05Проява и предразположеност

Онкогени
Наличие на амплификация на Myc, висока експресия на c-myc

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% топлинно активираниFBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Веднъж или два пъти седмично добавяйте по 5 ml свежа среда за клетъчни култури, веднага щом средата стане кисела. Култивирайте веднага щом се появят много големи клъстери. Разделете клъстерите, като съберете клетките, изплакнете ги веднъж с PBS без калций/магнезий и добавете 3-5 ml Accutase. Инкубирайте в продължение на 10 минути при 37 градуса по Целзий. Съберете клетките след центрофугиране, ресуспендирайте ги в свежа клетъчна среда и ги пребройте.
Плътност на засяването
2 до 4 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
Клетките се възстановяват след замразяване в рамките на 24 до 48 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме 50% базова среда + 40% FBS + 10% DMSO или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
46 години
Етническа принадлежност
Кавказки