Siirry sisältöön
SCLC-21H-solut
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Syöpä
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
SCLC21H

Asiakirjat

SCLC-21H-solut

Cell line · Tuotenumero 300225

SCLC-21H-solulinja on peräisin pikkusoluisen keuhkosyövän (SCLC), tyypin ”oat cell”, sairastavan potilaan keuhkopussinesteestä. Tämä solulinja, yksinään...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

SCLC-21H-solulinja on peräisin pienisoluista keuhkosyöpää (SCLC) sairastavan, kaurasolujen alatyyppiin kuuluvaa keuhkosyöpää sairastavan potilaan pleuraeritteestä. Tämä solulinja ja SCLC-22H muodostettiin kemoterapian aikana, ja SCLC-21H oli toinen solulinja, joka saatiin 15 päivän lisähoidon jälkeen. Vaikka molemmat solulinjat ovat peräisin samalta potilaalta, niillä on merkittävästi erilaisia biokemiallisia, morfologisia ja kineettisiä ominaisuuksia. SCLC-21H:lla on esimerkiksi nopeampi populaation kaksinkertaistumisaika ja korkeampi pesäkkeiden muodostustehokkuus kuin SCLC-22H:lla. Nämä erot tekevät SCLC-21H:sta erityisen työkalun SCLC:n tiettyjen muunnosmuotojen tutkimiseen.

Biokemiallisesti SCLC-21H eroaa SCLC-22H:sta siinä, että sen keskeisten neuroendokriinisten merkkiaineiden, kuten L-Dopa-dekarboksylaasin, bombesiinin ja karsinoembryonisen antigeenin, pitoisuudet ovat alhaiset tai niitä ei voida havaita. Molemmat solulinjat ilmentävät kuitenkin suuria määriä neuronispesifistä enolaasia ja kreatiinikinaasin isoentsyymiä BB, jotka ovat SCLC:lle tyypillisiä merkkiaineita. Lisäksi vaikka molemmissa solulinjoissa esiintyy c-myc-monistumista, SCLC-21H:ssa on lisäksi uudelleenjärjestäytynyt ja monistunut EcoRI-c-myc-fragmentti, mikä korostaa entisestään sen geneettistä ainutlaatuisuutta.

Rakenteellisesti SCLC-21H:n kasvu on löysää viljelyssä, ja siinä on näkyvät tumat ja runsaasti sytoplasmaa, mikä on ristiriidassa SCLC-22H:n tiiviimmän morfologian kanssa. Ultrarakenteellisesti tiheiden ydinrakeiden esiintyminen SCLC-21H:ssa vahvistaa sen neuroendokriinisen alkuperän, ja se luokitellaan SCLC:n muunnosmuodoksi. Nämä erityispiirteet tekevät SCLC-21H:sta arvokkaan mallin, jonka avulla voidaan tutkia pienisoluisen keuhkosyövän muunnosmuotoja ja ymmärtää niiden vastetta kemoterapiaan.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Syöpä
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • SCLC21H

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Kasvaimia aiheuttava
Kyllä alastomilla hiirillä
Ploidisuus
Aneuploidinen
Karyotyyppi
Modaalinen kromosomiluku 42/43, vaihteluväli 39-44. Kromosomin 3p deleetio.
Kaksinkertaistumisaika
45 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
SCLC-21H (Cytionin luettelonumero 300225)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0024

05Ilmentyminen ja alttius

Onkogeenit
Myc-monistuminen, c-myc-ekspressio korkea

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisätään elatusaineeseen 10 % lämpöinaktivoitua FBS:ää
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Kerran tai kahdesti viikossa lisätään 5 ml tuoretta soluviljelyalustaa heti, kun elatusaine happamoituu. Suculture heti, kun havaitaan useita hyvin suuria klustereita. Klusterit hajotetaan keräämällä solut, huuhtelemalla kerran kalsium-/magnesiumittomalla PBS:llä ja lisäämällä 3-5 ml Accutaseaasia. Inkuboidaan 10 minuuttia 37 asteessa. Kerätään solut sentrifugoinnin jälkeen, suspendoidaan uudelleen tuoreeseen soluviljelyaineeseen ja lasketaan.
Kylvötiheys
2–4 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Solut toipuvat jäädytyksestä 24-48 tunnin kuluessa.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme 50 % perusmediaa + 40 % FBS + 10 % DMSO:ta eli CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytysstressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
46 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen