Células SCLC-21H

A linha celular SCLC-21H foi derivada da efusão pleural de um doente com cancro do pulmão de pequenas células (SCLC) do subtipo oat cell. Esta linha celular, juntamente com a SCLC-22H, foi estabelecida durante um período de quimioterapia, sendo a SCLC-21H a segunda a ser derivada após 15 dias adicionais de tratamento. Embora ambas as linhas celulares tenham tido origem no mesmo doente, apresentam propriedades bioquímicas, morfológicas e cinéticas significativamente diferentes. A SCLC-21H, por exemplo, tem um tempo de duplicação da população mais rápido e uma maior eficiência de formação de colónias em comparação com a SCLC-22H. Estas diferenças fazem do SCLC-21H uma ferramenta distinta para o estudo de certas formas variantes de SCLC.

Bioquimicamente, a SCLC-21H difere da SCLC-22H pelos seus níveis baixos ou indetectáveis de marcadores neuroendócrinos fundamentais, como a L-Dopa descarboxilase, a bombesina e o antigénio carcinoembrionário. No entanto, ambas as linhas celulares expressam níveis elevados de enolase específica dos neurónios e da isoenzima BB da creatina quinase, que são marcadores caraterísticos do CPPC. Além disso, embora ambas as linhas celulares apresentem amplificação do c-myc, o SCLC-21H contém um fragmento EcoRI c-myc adicional rearranjado e amplificado, o que realça ainda mais a sua singularidade genética.

Estruturalmente, a SCLC-21H apresenta um crescimento frouxo em cultura e apresenta nucléolos proeminentes e citoplasma abundante, contrastando com a morfologia mais compactada da SCLC-22H. A presença de grânulos centrais ultra-estruturais densos no SCLC-21H confirma a sua origem neuroendócrina, sendo classificado como representando uma forma variante de SCLC. Estas caraterísticas distintas fazem do SCLC-21H um modelo valioso para explorar as formas variantes do cancro do pulmão de pequenas células e compreender a sua resposta à quimioterapia.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia