Cellule SCLC-21H

La linea cellulare SCLC-21H è stata derivata dal versamento pleurico di un paziente con carcinoma polmonare a piccole cellule (SCLC) del sottotipo a cellule di avena. Questa linea cellulare, insieme alla SCLC-22H, è stata creata durante un periodo di chemioterapia, mentre la SCLC-21H è stata la seconda ad essere derivata dopo altri 15 giorni di trattamento. Sebbene entrambe le linee cellulari provengano dallo stesso paziente, presentano proprietà biochimiche, morfologiche e cinetiche significativamente diverse. SCLC-21H, ad esempio, ha un tempo di raddoppio della popolazione più rapido e un'efficienza di formazione delle colonie più elevata rispetto a SCLC-22H. Queste differenze rendono SCLC-21H uno strumento distinto per lo studio di alcune forme varianti di SCLC.

Dal punto di vista biochimico, SCLC-21H si differenzia da SCLC-22H per i livelli bassi o non rilevabili di marcatori neuroendocrini chiave come la L-Dopa decarbossilasi, la bombesina e l'antigene carcinoembrionale. Tuttavia, entrambe le linee cellulari esprimono alti livelli di enolasi neurone-specifica e dell'isoenzima BB della creatina chinasi, che sono marcatori caratteristici del SCLC. Inoltre, mentre entrambe le linee cellulari presentano un'amplificazione di c-myc, la SCLC-21H contiene un ulteriore frammento di c-myc EcoRI riarrangiato e amplificato, evidenziando ulteriormente la sua unicità genetica.

Strutturalmente, SCLC-21H mostra una crescita lenta in coltura e presenta nucleoli prominenti e citoplasma abbondante, in contrasto con la morfologia più serrata di SCLC-22H. La presenza di granuli ultrastrutturalmente densi nel nucleo di SCLC-21H conferma la sua origine neuroendocrina ed è classificata come una forma variante di SCLC. Queste caratteristiche distinte rendono il SCLC-21H un modello prezioso per esplorare le forme varianti del carcinoma polmonare a piccole cellule e comprendere la loro risposta alla chemioterapia.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia