Przejdź do treści
Komórki SCLC-21H
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
SCLC21H

Dokumenty

Komórki SCLC-21H

Cell line · Numer produktu 300225

Linia komórkowa SCLC-21H została wyhodowana z wysięku opłucnowego pacjenta z drobnokomórkowym rakiem płuca (SCLC) podtypu komórkowego typu owsianego. Linia ta, sama w sobie...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa SCLC-21H została uzyskana z wysięku opłucnowego pacjenta z drobnokomórkowym rakiem płuc (SCLC) podtypu owsianokomórkowego. Ta linia komórkowa, wraz z SCLC-22H, została utworzona w okresie chemioterapii, przy czym SCLC-21H była drugą uzyskaną po dodatkowych 15 dniach leczenia. Chociaż obie linie komórkowe pochodzą od tego samego pacjenta, wykazują one znacząco różne właściwości biochemiczne, morfologiczne i kinetyczne. SCLC-21H, na przykład, ma szybszy czas podwojenia populacji i wyższą wydajność tworzenia kolonii w porównaniu do SCLC-22H. Różnice te sprawiają, że SCLC-21H jest odrębnym narzędziem do badania niektórych wariantów SCLC.

Pod względem biochemicznym SCLC-21H różni się od SCLC-22H niskim lub niewykrywalnym poziomem kluczowych markerów neuroendokrynnych, takich jak dekarboksylaza L-Dopa, bombesyna i antygen rakowo-płodowy. Jednak obie linie komórkowe wyrażają wysoki poziom enolazy specyficznej dla neuronów i izoenzymu BB kinazy kreatynowej, które są charakterystycznymi markerami SCLC. Co więcej, podczas gdy obie linie komórkowe wykazują amplifikację c-myc, SCLC-21H zawiera dodatkowy rearanżowany i amplifikowany fragment EcoRI c-myc, co dodatkowo podkreśla jego wyjątkowość genetyczną.

Strukturalnie, SCLC-21H wykazuje luźny wzrost w hodowli i charakteryzuje się wyraźnymi jąderkami i obfitą cytoplazmą, kontrastując z bardziej upakowaną morfologią SCLC-22H. Obecność ultrastrukturalnie gęstych granulek rdzenia w SCLC-21H potwierdza jego neuroendokrynne pochodzenie i jest klasyfikowany jako reprezentujący wariant SCLC. Te odmienne cechy sprawiają, że SCLC-21H jest cennym modelem do badania wariantów drobnokomórkowego raka płuc i zrozumienia ich odpowiedzi na chemioterapię.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
  • SCLC21H

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Nowotworotwórczy
Tak u nagich myszy
Status ploidii
Aneuploid
Karyotyp
Modalna liczba chromosomów 42/43, zakres 39-44. Delecja chromosomu 3p.
Czas podwojenia
45 godzin

04Identyfikatory

Źródło
SCLC-21H (numer katalogowy Cytion 300225)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0024

05Ekspresja i podatność

Onkogeny
Obecna amplifikacja Myc, wysoka ekspresja c-myc

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% termicznie inaktywowaną FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Raz lub dwa razy w tygodniu dodać 5 ml świeżego podłoża do hodowli komórkowej, gdy tylko podłoże stanie się kwaśne. Hodowlę należy zakończyć, gdy tylko zaobserwuje się wiele bardzo dużych skupisk. Zdysocjować skupiska poprzez zebranie komórek, jednokrotne przepłukanie PBS bez wapnia/magnezu i dodanie 3-5 ml Accutase. Inkubować przez 10 minut w temperaturze 37 stopni Celsjusza. Zebrać komórki po odwirowaniu, ponownie zawiesić w świeżym podłożu do hodowli komórkowej i policzyć.
Gęstość wysiewu
2 do 4 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Komórki zregenerują się po zamrożeniu w ciągu 24 do 48 godzin.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 50% pożywki podstawowej + 40% FBS + 10% DMSO lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
46 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski